[发明专利]一种香菇中L‑噻唑烷‑4‑羧酸的快速检测方法

摘要

本发明属于分析检测领域，具体涉及一种香菇中L‑噻唑烷‑4‑羧酸的快速检测方法，包括香菇前处理提取、样品净化、液相色谱检测。其主要步骤如下样品用甲醇‑水（7030，v/v）进行前处理提取；经过WondaSep MAX固相萃取小柱净化处理；样品分析采用Inertsil HILIC亲水作用色谱柱（4.6×250 mm，5μm）进行分离测定，流动相采用乙腈‑0.1%磷酸水（8515，v/v）等度洗脱，流速0.8 mL/min，检测波长193 nm，柱温30℃，进样量5μL。该方法无需衍生化、前处理简单快速、重现性好。弥补了当前基于高效液相色谱不能直接准确快速的对香菇中L‑噻唑烷‑4‑羧酸分离测定的空缺。

主权项

一种香菇中L‑噻唑烷‑4‑羧酸的快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）配制标准溶液：配制2 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL系列质量浓度的L‑噻唑烷‑4‑羧酸标准溶液，测定L‑噻唑烷‑4‑羧酸标准品在2～100 μg/mL范围内的浓度和峰面积的线性关系；（2）香菇样品的预处理：准确称取2.0 g研磨后的香菇样品于50 mL离心管中，加入20 mL甲醇水溶液摇匀，100 W功率下超声提取20 min；再在10000 r/min转速下，离心10 min；离心后，取10 mL上清液到50 mL离心管，加入10 mL乙腈饱和的正己烷，涡旋混匀1 min，除去脂类物质，取5 mL下层提取液加入到试管中，再加5 mL 2wt%氨水摇匀作为上样液；（3）固相萃取：采用WondaSep MAX固相萃取小柱，先分别用3 mL甲醇和3 mL去离子水将小柱活化，再加入步骤（2）提取的上样液过柱后，分别用3 mL 5wt%氨水和5 mL甲醇淋洗小柱，小柱空干后，用4 mL甲醇‑1.0 wt%甲酸水溶液的混合液作为洗脱液，洗脱目标物，最后，氮吹仪设置温度40℃将洗脱液吹干，加入1 mL乙腈‑0.1wt%磷酸溶液定容，涡旋混匀后过0.22 μm有机滤膜，供HPLC测定；（4）液相色谱测定：操作系统为岛津LC‑solution工作站；色谱柱：岛津Inertsil HILIC液相色谱柱，其规格为4.6×250 mm，5 μm；流动相：有机相为乙腈，无机相为0.1wt%磷酸水溶液，体积比为85:15，等度洗脱；流速：0.8 mL/min；柱温：30℃；进样体积：5 μL；检测波长：193 nm；以上参数选定后，分别对提取的样品进行分离测定。