[发明专利]一种测定水体中大环内酯类抗生素的采样测定方法

摘要

本发明公开了一种用于测定水体中大环内酯类抗生素的被动采样器及其应用，属于抗生素的采样及测定领域。被动采样器包括采样桶和吸附剂，采样桶采用100目不锈钢丝网制成，采样桶内充填颗粒状XAD树脂。采样测定方法的主要步骤为吸附剂的清洗；采样过程；吸附剂中抗生素的提取；HPLC‑MS/MS测定抗生素含量；采样速率的测定；计算水体中抗生素的时间加权平均浓度Cw。本发明的被动采样器的制作、装配简单，价格低廉，吸附剂中大环内酯类抗生素的提取只需通过简单的溶剂淋洗，大大降低了有机溶剂的使用量，且缩短了分析时间，适合于实际水体中大环内酯类抗生素的被动采样和检测。

主权项

一种测定水体大环内酯类抗生素的采样测定方法，采用的被动采样器包括采样桶和吸附剂，采样桶上包括旋盖；所述的采样桶由不锈钢丝网制成，所述的吸附剂充填在所述的采样桶内，主要步骤如下：i)吸附剂的清洗采样开始前，吸附剂依次用水和甲醇清洗，然后于65℃烘箱中烘干，冷却后储存于棕色玻璃瓶中待用；ii)采样过程将经过步骤i)处理后的吸附剂装入不锈钢丝网的采样桶中，旋紧旋盖；采样桶固定于一个竹制的吊篮内，吊篮用绳索固定于在泡沫塑料的下方20‑30cm，使得被动采样器能悬挂于水中，在采样点的位置，泡沫塑料用绳索固定于桥下，离河岸超过2m，进行采样，采样时间为t，单位为d；采样结束后，取出被动采样器，密封于封口袋中运回实验室进行处理；iii)吸附剂中抗生素的提取将步骤ii)采样完成的被动采样器取出后，先用超纯水淋洗，后放入65℃的烘箱中烘干1‑2h；冷却至室温后，将采样桶内的树脂通过长颈小漏斗转移至10mL的SPE空管内，加入乙腈进行洗脱，收集洗脱液于10mL氮吹管中，在40℃水浴条件下氮吹至干，然后加入20μL内标溶液，溶液的浓度为200ppb，用甲醇定容至1mL，最后用液相色谱‑串联质谱(HPLC‑MS/MS)进行检测；iv)HPLC‑MS/MS测定抗生素的含量使用HPLC‑MS/MS测定iii)提取的萃取液中的大环内酯类抗生素的含量，其中，液相色谱条件：Waters Xterra C18液相色谱柱，色谱柱的规格为2.1×100mm，3.5μm；流动相A：0.1％甲酸水溶液，流动相B：甲醇；流速350μL/min，进样量5μL，柱温35℃；梯度洗脱程序：0～0.5min，保持5％B；0.5～1.5min，5％B～30％B；1.5～11.5min，30％B～70％B；11.5～12min，70％B～100％B；12～12.5min，保持100％B，12.5～13min，100％B～5％B，13～18min，保持5％B；样品需用0.45μm的PTFE滤头过滤后方可进样；质谱条件:离子源为电喷雾正电离源(ESI+)；离子源Ⅰ(Ion Source Gas 1，GS1)和Ⅱ(Ion Source Gas 2，GS2)的气体流速分别为55mL/min和55mL/min，碰撞气(Collision Gas，CAD)和气帘气(Curtain Gas，CUR)流速分别为7mL/min和25mL/min，气体均为N2；电离电压(Ion Spray Voltage，IS)为4500V；辅助加热气温度(TEM)为450℃；检测方式为多反应选择监测(Multiple reaction monitoring,MRM)离子模式；v)采样速率的测定采样实验室模拟实验测定被动采样器对水中不同大环内酯类抗生素的采样速率，在一定时间内，被动采样器对水中大环内酯类抗生素的富集呈线性，其斜率为k，由式一计算被动采样器对大环内酯类抗生素的采样速率：Rs＝k/Cw    式一其中：Rs为采样速率，单位L/d；Cw为水中大环内酯类抗生素的平均浓度，单位μg/L；vi)计算大环内酯类抗生素的浓度水中抗生素的加权平均浓度Cw’由式二计算得到：Cw’＝Ms/(Rs×t)    式二其中：Cw’为实际水中大环内酯类抗生素的加权平均浓度，单位μg/L；Ms为采样时间内被动采样器中分析物的量，单位μg；Rs为被动采样器的采样速率，通过式一计算得到，单位L/d；t为采样时间，单位d。