[发明专利]一种高效液相色谱串联二级质谱技术检测尿液中8-羟基脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷的方法

摘要

本发明公开了一种高效液相色谱串联二级质谱技术检测尿液中8-羟基脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷的方法，采用高效液相色谱串联二级质谱技术分别检测标准品溶液和经过预处理的尿液样品中的8-羟基脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷，先利用高效液相色谱技术将8-羟基脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷分离，再利用二级质谱同位素内标定量法，以标准品与内标物的浓度比为X轴，标准品与内标物的峰面积比为Y轴，建立校准曲线，计算出8-羟基脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷的含量。与现有技术相比，本发明方法高效稳定，回收率和稳定性良好，具有准确、简便、经济、高效等优点，适于临床检测中推广应用。

主权项

一种高效液相色谱串联二级质谱技术检测尿液中8‑羟基脱氧鸟苷和8‑羟基鸟苷的方法，其特征在于，采用高效液相色谱串联二级质谱技术分别检测标准品溶液和经过预处理的尿液样品中的8‑羟基脱氧鸟苷和8‑羟基鸟苷，先利用高效液相色谱技术将8‑羟基脱氧鸟苷和8‑羟基鸟苷分离，再利用二级质谱同位素内标定量法，以标准品与内标物的浓度比为X轴，标准品与内标物的峰面积比为Y轴，建立校准曲线，计算出8‑羟基脱氧鸟苷和8‑羟基鸟苷的含量，具体色谱条件为：(1)高效液相色谱条件：流动相A：0.1％v/v的甲酸水溶液；流动相B：乙腈；色谱柱为Ultimate Polar‑RP，2.1×100mm，3μm；流速为0.4mL/min；柱温为30℃；进样量为10μL；采用梯度洗脱方式，见表1；表1液相梯度洗脱参数(2)质谱条件：在电喷雾电离正离子检测模式下，采用多反应监测的质谱扫描模式；喷雾针电压为5500V；碰撞气为5psi；气帘气为50psi；离子源雾化气和加热辅助气均为65psi；脱溶剂气温度为550℃。