[发明专利]一种基于复制缺陷性重组慢病毒的CAR-T转基因载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201610008360.5 | 申请日： | 2016-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN105602992B | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 祁伟;俞磊;余宙 | 申请（专利权）人： | 上海优卡迪生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66;A61K48/00;A61P35/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 上海市汇业律师事务所 31325 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 201201 上海市浦东新区张江*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于复制缺陷性重组慢病毒的CAR‑T转基因载体，包括：用于质粒复制的原核复制子pUC Ori序列；用于目的菌株大量扩增的含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列；用于增强真核细胞内的复制的病毒复制子SV40 Ori序列；用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件；用于真核细胞表达绿色荧光的ZsGreen1绿色荧光蛋白；用于共同转录表达蛋白质的IRES核糖体结合序列；用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子；用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体；用于增强转基因的表达效率的eWPRE增强型土拨鼠乙肝病毒转录后调控元件。此外，还公开了该载体的构建方法和应用。本发明能显著提高细胞因子的分泌、CAR‑T细胞的体外杀伤作用，且临床治疗效果突出。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 复制 缺陷 重组 病毒 car 转基因 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于复制缺陷性重组慢病毒的CAR‑T转基因载体，其特征在于，包括：用于质粒复制的原核复制子pUCOri序列，如SEQIDNO.2所示；用于目的菌株大量扩增的含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列，如SEQIDNO.1所示；用于增强真核细胞内的复制的病毒复制子SV40Ori序列，如SEQIDNO.3所示；用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件；用于真核细胞表达绿色荧光的ZsGreen1绿色荧光蛋白，如SEQIDNO.11所示；用于共同转录表达蛋白质的IRES核糖体结合序列，如SEQIDNO.12所示；用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子，如SEQIDNO.14所示；用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体；用于增强转基因的表达效率的eWPRE增强型土拨鼠乙肝病毒转录后调控元件，如SEQIDNO.13所示。
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