[发明专利]一种快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法

摘要

本发明公开一种快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法，该方法包括以浓度为0.04M的醋酸钡溶液为缓冲液，配制琼脂糖凝胶，每个点样孔上样，将凝胶置于0.04M醋酸钡溶液缓冲液中，在缓冲液上层加入少许石油醚，封住气液界面；将整个电泳槽体系置于冷室中电泳，电泳完毕，轻压脱水；将0.2%的甲苯胺蓝溶解在乙醇：水：乙酸形成的溶剂中，配制染色液，将凝胶悬浮在染色液中，然后用乙醇：水：乙酸混合成的溶液洗涤。本发明通过在0.04M醋酸钡缓冲液中进行一次琼脂糖凝胶电泳，通过对电泳液进行降温处理、降低电泳电压、延长电泳时间、石油醚封气液界面等方法，有效地将快速移动肝素与硫酸皮肤素分离。

主权项

一种快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法，其特征在于，该快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法包括：步骤一，以浓度为0.04M的醋酸钡溶液为缓冲液，配制胶浓度0.4%‑0.8%的琼脂糖凝胶，胶厚度在3‑5mm，梳齿之间距离在5mm；步骤二，每个点样孔上样量在5‑10微克；步骤三，将凝胶置于0.04M醋酸钡溶液缓冲液中，缓冲液顶部没过凝胶1‑2mm，然后在缓冲液上层加入石油醚，封住气液界面；步骤四，将整个电泳槽体系置于冷室中，电泳槽两端连接电泳仪电源，施以120V电压，电泳时间为2小时；步骤五，电泳完毕，将凝胶板取出，在Cetavlon浸透大于3小时，取出后以干燥滤纸铺盖于凝胶上，轻压脱水；步骤六，将0.2%的甲苯胺蓝溶解在乙醇：水：乙酸比例为40:9:1形成的溶剂中，配制染色液，将凝胶悬浮在染色液中，放于摇床缓慢振荡染色30‑60分钟,然后用乙醇：水：乙酸比例为50:49:1混合成的溶液洗涤。