[发明专利]用于检测人类PDGFRA基因D842V突变的引物、探针及试剂盒

摘要

本发明公开了用于检测人类PDGFRA基因D842V突变的引物、探针及试剂盒，其中引物及探针包括突变上游ARMS引物PM1‑F，与D842V(2525A>T)位点突变序列特异性结合，选择性扩增突变序列，突变下游引物PW1‑R，与PDGFRA基因保守序列结合；5’端标记有FAM信号3’端标记MGB的检测探针PW1‑P，能与扩增片段结合；以及5’端双脱氧修饰3’端MGB标记的阻断探针PW1‑B，能与D842V位点野生型序列特异性结合，抑制野生型非特异扩增。本发明的引物及探针特异性高、灵敏度好，检测能力高达1％。由其制备的试剂盒检测结果准确易读，操作简单快速，适用范围广。

主权项

1.用于检测人类PDGFRA基因D842V突变的试剂盒，其特征在于，包括用于检测人类PDGFRA基因D842V突变的引物和探针、外控引物和探针，以及内控引物和探针；用于检测人类PDGFRA基因D842V突变的引物和探针的核苷酸序列如下：突变上游ARMS引物PM1‑F：SEQ ID NO:1，突变下游引物PW1‑R：SEQ ID NO:2，检测探针PW1‑P：SEQ ID NO:3，阻断探针PW1‑B：SEQ ID NO:4；其中，检测探针核苷酸序列5’端标记有荧光基团，3’端标记有淬灭基团；阻断探针的核苷酸序列5’端经过双脱氧修饰，3’端标记有淬灭基团；外控引物和探针的核苷酸序列如下：外控上游引物PR‑F：SEQ ID NO:5，外控下游引物PR‑R：SEQ ID NO:6，外控检测探针PR‑P：SEQ ID NO:7，外控检测探针核苷酸序列的5’端标记有FAM，3’端标记有MGB；内控引物和探针的核苷酸序列如下：内控上游引物IC‑F：SEQ ID NO:8，内控下游引物IC‑R：SEQ ID NO:9，内控检测探针IC‑P：SEQ ID NO:10，内控检测探针核苷酸序列的5’端标记有JOE，3’端标记有BHQ1。