[发明专利]一种番红花药材DNA的提取方法

摘要

本发明公开了一种番红花药材DNA的提取方法，包括采用番红花干燥柱头用液氮充分研磨，然后加入4×CTAB与等体积的氯仿异戊醇，离心，然后加入2倍体积的预冷无水乙醇和0.2倍体积的NaAc，沉淀，最后用2.5倍体积的无水乙醇洗涤，将样品保存在-20℃冰箱备用；本发明将传统的CTAB方法进一步改良和优化，大大的提高了实验效率。利用本方法从番红花药材提取获得的DNA质量较高，且DNA纯度符合下游应用的要求；本提取方法对干燥药材具有高效、经济、安全和简便的特点。

主权项

一种番红花药材DNA的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用番红花干燥柱头，取20mg样品置于1.5mL离心管中，加入液氮充分研磨1‑3min；(2)加入600‑800μL预热的4×CTAB与等体积的氯仿异戊醇，旋涡振荡3min，充分混匀，10000‑13000rpm离心5‑8min，吸取上清液于另一离心管中；(3)加入2倍体积的预冷无水乙醇和0.2倍体积的NaAc，沉淀DNA 30‑60min后，10000‑13000rpm离心8min，弃上清液；(4)用2.5倍体积的无水乙醇洗涤DNA 2～3次；(5)将样品DNA在超净工作台上吹干后，加入100μL TE缓冲液，将样品保存在‑20℃冰箱备用；(6)用琼脂糖和1×TAE溶液制备0.5％琼脂糖凝胶，点样后进行45min电泳，再在凝胶成像分析系统下检测。