[发明专利]一种抗致病菌芽胞杆菌的快速筛选方法在审
| 申请号： | 201610030293.7 | 申请日： | 2016-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN105462839A | 公开（公告）日： | 2016-04-06 |
| 发明（设计）人： | 汪以真;张煜;陈珊;胡汪洋 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12N1/20;C12R1/07 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 林松海 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种抗致病菌芽胞杆菌的快速筛选方法。1）取1g的生腌菜，加入15mL生理盐水，水浴加热至65℃，并孵育10min，孵育结束后，温和混匀，稀释10倍，取50µＬ涂布于LB平板上，37℃培养12小时；2）将芽孢杆菌单菌落于LB培养基液体培养3~4小时后，滴1µL于固体营养培养基平板上，37℃生长12h-14h，然后将平板倒扣于盛有5ml乙醇的培养皿盖上放置10 min，移去皿盖，在通风柜中挥发乙醇15 min，在固体营养培养基表面铺上培养好的指示菌悬液，均匀布满后，倾倒出多余菌液，待培养基晾干后，于37℃培养12~14h，观察比较接种点周围抑菌圈大小及透明程度，可得到抗菌效果最优的菌株。本方法可以避免摸索发酵条件，同时增加菌种初筛数目，缩短初筛时间，提高初筛效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 致病菌 杆菌 快速 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种抗致病菌芽胞杆菌的快速筛选方法，其特征是：1）取1g的生腌菜，加入15mL 生理盐水，水浴加热至65℃，并孵育10min，孵育结束后，温和混匀，稀释10倍，取50µＬ涂布于LB平板上，37℃培养12小时后，形成芽孢杆菌单菌落菌斑；2）将芽孢杆菌单菌落于LB培养基液体培养3~4小时后，滴1µL于固体营养培养基平板上，37℃生长12h‑14h，然后将平板倒扣于盛有5ml乙醇的培养皿盖上放置10 min，移去皿盖，在通风柜中挥发乙醇15 min，在固体营养培养基表面铺上培养好的指示菌悬液，均匀布满后，倾倒出多余菌液，待培养基晾干后，于37℃培养12~14h，观察比较接种点周围抑菌圈大小及透明程度，可得到抗菌效果最优的菌株。
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