[发明专利]一种提取纯化波形蛋白的方法在审
| 申请号： | 201610038575.1 | 申请日： | 2016-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN105693841A | 公开（公告）日： | 2016-06-22 |
| 发明（设计）人： | 方成;陈卓 | 申请（专利权）人： | 武汉轻工大学 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C07K1/18 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 涂洁 |
| 地址： | 430023 湖北省*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明首次公开一种提取纯化波形蛋白的方法，解决了既有文献报道的波形蛋白提取工艺复杂、成本高、周期长的问题。本发明以猪眼晶状体为原料，经粗提、精提、分离、纯化和透析后制成冻干粉。在分离步骤中使用DEAE Sepharose FF柱进行一次性线性洗脱。本发明方法具有高效、低成本的特点，提取波形蛋白纯度高、相对回收率高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 纯化 波形 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种波形蛋白的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)粗提：解剖猪眼取晶状体，浸入粗提液后匀浆制得混悬液；将混悬液离心后弃上清液，取沉淀物重悬数次并离心；取沉淀物冻干制得粗提粉；(2)精提：用精提液溶解步骤(1)中的粗提粉，离心后弃沉淀，取上清液浓缩后得到精提物溶液；(3)分离：取精提物溶液上样到预平衡的DEAE Sepharose FF柱，先使用第一缓冲液洗脱大部分的42kDa杂蛋白，再使用第二缓冲液进行线性洗脱，收集线性洗脱的馏分；(4)纯化：对收集的馏分用10％SDS‑PAGE电泳，做Western‑Blot实验进行蛋白成分鉴定；合并53kDa目标波形蛋白含量达80wt％以上的馏分，经透析、冻干即得纯化Vim粉。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于武汉轻工大学，未经武汉轻工大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610038575.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：鼻腔用止血器
- 下一篇：伊贝母中的异甾体类生物碱化合物及其制备方法和用途
