[发明专利]肺癌特异性转录调控元件的筛选方法在审
| 申请号： | 201610040342.5 | 申请日： | 2016-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN105506062A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | 许瑞安;李文茂;高燕;吴雅清;蔡双凤;崔秀灵 | 申请（专利权）人： | 华侨大学 |
| 主分类号： | C12Q1/66 | 分类号： | C12Q1/66 |
| 代理公司： | 泉州市文华专利代理有限公司 35205 | 代理人： | 戴中生 |
| 地址： | 362000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明提供肺癌特异性转录调控元件的筛选方法，通过UCSC数据库获取非小细胞肺癌A549细胞中DKK1基因位点周围27kb长区域的表观遗传信息，并预测得到12条候选增强子转录调控元件片段，该12条选增强子转录调控元件片段分别插至DKK1近端启动子上游，成功构建荧光素酶重组质粒；荧光素酶重组质粒分别转染到非小细胞肺癌A549细胞、非小细胞肺癌H460细胞、小细胞肺癌H446细胞、食道癌Eca-109细胞、正常肝细胞Chang liver和人胚肾细胞HEK293，并通过双荧光素酶报告基因检测系统检验相关候选元件活性，筛选到对DKK1启动子具有较高的增强表达作用的调控元件，且该筛选方法操作简单的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 肺癌 特异性 转录 调控 元件 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种肺癌特异性转录调控元件的筛选方法，其特征在于：通过UCSC数据库获取非小细胞肺癌A549细胞中DKK1基因位点周围27kb长区域的表观遗传信息，对获得的表观遗传信息进行分析预测得到12条候选增强子转录调控元件片段，接着将这12条选增强子转录调控元件片段分别插入到DKK1近端启动子上游，成功构建荧光素酶重组质粒；所得荧光素酶重组质粒分别转染到非小细胞肺癌A549细胞、非小细胞肺癌H460细胞、小细胞肺癌H446细胞、食道癌Eca‑109细胞、正常肝细胞Chang liver和人胚肾细胞HEK293，并通过双荧光素酶报告基因检测系统检验相关候选元件活性，筛选到对DKK1启动子具有较高的增强表达作用的调控元件即所述肺癌特异性转录调控元件。
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