[发明专利]一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法

摘要

本发明公开了一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法，是将待测的丝状真菌和标准菌的新鲜孢子悬液点种于察氏固体培养基的平板上，各菌株孢子之间点种距离不小于2cm，30℃培养5h，将葡萄糖检测液直接倒在以上长有菌落的平板上，并使其均匀覆盖平板上的所有培养基表面，40℃静置10min，观察菌落周围形成的红色晕圈，比较待测菌株与标准菌株形成的红色晕圈的大小，若红色晕圈比标准菌株形成的大即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力强，若红色晕圈比标准菌株形成的小即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力弱。本发明方法操作简单，成本低廉，是一种简便、高效、可靠的适用于鉴定丝状真菌合成低聚果糖能力的方法，具有工业应用价值，值得推广。

主权项

1.一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法，步骤是：(1)将待测的丝状真菌新鲜孢子分别用无菌生理盐水稀释至1×107～108个/mL，制得丝状真菌孢子悬液备用；其中所述丝状真菌是：黑曲霉(Aspergillus niger)、塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)或棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)；同时，将工业用黑曲霉XG530菌株作为本检测丝状真菌合成低聚果糖能力平板显色方法的标准菌株，以相同实验条件制备孢子悬液备用；(2)分别取步骤(1)制备的丝状真菌孢子悬液及标准菌株孢子悬液1μl，点种于察氏固体培养基的平板上，其中各菌株孢子之间点种距离不小于2cm，在30±3℃培养5～10小时；(3)配制葡萄糖检测液，直接倒在步骤(2)培养后的长有菌落的平板上，并使其均匀覆盖平板上的所有培养基表面，然后40±5℃静置10～20min，观察菌落周围形成的红色晕圈，比较待测菌株与标准菌株形成的红色晕圈的大小，若红色晕圈比标准菌株形成的大即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力强，若红色晕圈比标准菌株形成的小即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力弱；其中，所述葡萄糖检测液的配方是：葡萄糖氧化酶(GOD)4～6U/ml，过氧化物酶(POD)0.2～0.4U/ml，4‑氨基安替吡啉(4‑AAP)0.1mg/ml，苯酚1mg/ml，琼脂粉0.007g/ml。