[发明专利]一种快速检测玉米组织中三种苯并噁嗪类防御物质的方法

摘要

本发明涉及一种快速检测玉米组织中三种苯并噁嗪类防御物质的方法，属植物化学分析领域。方法为取玉米的根或叶片于液氮中磨至粉末状，置于15mL预先加入5mL乙酸乙酯的样品管，混匀后放置60min，期间混匀3次；室温的萃取液在振荡器上涡旋震荡2分钟呈悬浮状；悬浮液经滤纸过滤于100mL心形旋蒸瓶中，用5mL乙酸乙酯冲洗2次，共15mL滤液；滤液于40℃旋蒸5min至干燥状，后用500μL甲醇溶解后置于1mL样品瓶中，密封保存于‑80℃；采用Agilent1200高效液相色谱仪和Extend C18 100×4.6mm色谱柱进行检测。本发明的有益效果在于能较真实地反应玉米植株体内DIMBOA的含量；能同时检测玉米根系或叶片组织提取物中DIBOA、DIMBOA和MBOA的含量，减少了色谱试验步骤和时间，是一种简便有效的方法。

主权项

一种快速检测玉米组织中三种苯并噁嗪类防御物质的方法，其特征在于该方法的步骤如下：(1)、玉米样品的提取取玉米的根或叶片于液氮中磨碎至粉末状；将粉末置于15mL预先加入5mL乙酸乙酯的样品管，混匀后放置60min，期间混匀3次；恢复至室温的萃取液在振荡器上涡旋震荡2分钟呈悬浮状；上述悬浮液经双层灭菌滤纸过滤于100mL心形旋蒸瓶中，用5mL乙酸乙酯冲洗2次，共15mL滤液；滤液经旋转蒸发仪于40℃旋蒸5min，至干燥状，然后用500μL甲醇充分溶解后置于1mL棕色样品瓶中，密封保存于‑80℃；(2)、样品检测采用Agilent 1200高效液相色谱仪和Extend C18 100×4.6mm色谱柱进行检测；取1mL磷酸溶入999mL的灭菌水配置成0.1％的磷酸作为流动相A，而将100％甲醇作为洗脱相B进行浓度梯度洗脱；流动相A：0min，80％；10min，30％；10.5min，0％；洗脱相B：0min，20％；10min，70％；10.5min，100％；流速为0.5mL/min，色谱柱温为30℃，进样量为5μL，检测波长为254nm，出峰时间则为：DIBOA 7.420min，DIMBOA 8.186min，MBOA 9.747min。