[发明专利]不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水解方法有效
| 申请号： | 201610052343.1 | 申请日： | 2016-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN105669873B | 公开（公告）日： | 2018-01-16 |
| 发明（设计）人： | 任涛;杨朝晖;庞强;安建峰;缪凯;陈旭;刘建凯 | 申请（专利权）人： | 北京民海生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C08B37/00 | 分类号： | C08B37/00;A61K39/116;A61K39/09;A61P31/04 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 102600 北京市海淀区中关*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供针对不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水解方法，包括向不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水溶液中加入过氧化氢溶液与无机盐溶液对多糖进行水解，于50℃‑80℃反应3‑5小时，反应结束后，将含有不同大小多糖水解片段的反应混合物进行超滤浓缩，然后过Sepharose 4FF凝胶层析柱进行纯化，收集kD值0.2‑0.65的分离峰，经超滤浓缩、冻干后得到不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水解产物。采用本方法可以实现对不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水解，将荚膜多糖水解为不同大小的片段，所得水解片段均保留了抗原性，符合多价肺炎结合疫苗制备工艺的要求，可用于制备适合于2岁以下婴幼儿的多价肺炎结合疫苗。 | ||
| 搜索关键词： | 不同 血清 肺炎 链球菌 荚膜 多糖 水解 方法 | ||
【主权项】：
不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水解方法，其特征在于，向不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水溶液中加入过氧化氢溶液与硫酸锌溶液对多糖进行水解，于50℃‑80℃反应3‑5小时，反应结束后，将含有不同大小多糖水解片段的反应混合物进行超滤浓缩，然后过Sepharose 4FF凝胶层析柱进行纯化，收集Kd 值0.2‑0.65的分离峰，经超滤浓缩、冻干后得到不同血清型肺炎链球菌荚膜多糖的水解产物；对于1、2、3、4、18C、23F血清型的荚膜多糖，反应体系中荚膜多糖、过氧化氢与硫酸锌的质量比为1‑5：9：0.161；过柱纯化后，收集Kd 值0.2‑0.6的分离峰；对于6A、7F、9N、14、19F血清型的荚膜多糖，反应体系中荚膜多糖、过氧化氢与硫酸锌的质量比为1‑5：6：0.161；过柱纯化后，收集Kd 值0.3‑0.6的分离峰；对于5、6B、9V、19A、22F、33F血清型的荚膜多糖，反应体系中荚膜多糖、过氧化氢与硫酸锌的质量比为1‑5：4.5：0.161；过柱纯化后，收集Kd 值0.35‑0.65的分离峰。
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