[发明专利]一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法

摘要

本发明适用于纤维寡糖制备的技术领域，公开了一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法，包括如下步骤：制备反应原液、设定温度及pH值、底物原位吸附、固液分离处理、第一次水解处理、第二次水解处理、第三次水解处理和提纯纤维寡糖。本发明一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法，通过低β-葡萄糖苷酶的纤维素酶水解低聚木糖生产废渣，得到含有纤维寡糖的液相，通过固液分离方法并提纯得到纤维寡糖，采用三段水解模式，能高效地解除水解过程中产物对酶的反馈抑制作用，纤维寡糖的得率大大高于不分段水解模式下的纤维寡糖得率，较二段水解模式也明显提升，提高了纤维寡糖的生产产量，成本较低，资源利用率高，可工业化进行纤维寡糖的生产。

主权项

一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤一、制备反应原液：按1：20的比例称取底物纤维素和无菌水，将底物纤维素和无菌水倒入温度可设定的无菌容器中，得到底物纤维素浓度为5％的反应原液；步骤二、设定温度及pH值：调节无菌容器中的反应原液的pH值为7.0，设定无菌容器的温度恒为10℃；步骤三、底物原位吸附：称取一定量的里氏木霉纤维素酶，投入经步骤二处理后的反应原液中，搅拌均匀后得到吸附体系，吸附时间为30min；步骤四、固液分离处理：当吸附时间到达30min时，将无菌容器中的吸附体系快速倒入离心机中离心处理，分离除去吸附体系中的液相，得到含有适合于纤维寡糖制备的低β‑葡萄糖苷酶纤维素酶的离心沉渣；步骤五、第一次水解处理：将步骤四得到的含有低β‑葡萄糖苷酶纤维素酶的离心沉渣投至无菌容器中，在无菌容器中补加无菌水至原反应原液的体积，并调节无菌容器中的反应体系的pH值为4.80，无菌容器的温度设定为50℃，水解反应一段时间后，采用固液分离方法将液相移除；步骤六、第二次水解处理：在经过步骤五第一次水解处理得到的固体渣中补加一定无菌水至原反应原液的体积，调节无菌容器中的反应体系的pH值为4.80，无菌容器的温度设定为50℃，继续反应一段时间后，采用固液分离方法将液相移除；步骤七、第三次水解处理：在经过步骤六第二次水解处理后得到的固体渣中继续补加一定无菌水至原反应原液的体积，调节无菌容器中的反应体系的pH值为4.80，无菌容器的温度设定为50℃，继续反应一段时间后，采用固液分离方法再次将液相移除；步骤八、提纯纤维寡糖：收集经步骤五、步骤六和步骤七固液分离后的液相，并提取液相中的纤维寡糖反应产物，提纯得到纤维寡糖，可直接用于饲料添加剂。