[发明专利]一种筛选hERG钾离子通道激动剂和毒性检测方法

摘要

本发明涉及一种筛选hERG钾离子通道激动剂和毒性检测方法。具体而言，本发明首先涉及一种融合蛋白，含有作为该融合蛋白N端的来自线虫ERG家族钾离子通道UNC‑103蛋白N端第1‑85位氨基酸残基之间，长75‑85个氨基酸残基的片段；hERG或其至少包含S1‑S6跨膜区和环状核苷酸结合域的片段；和作为该融合蛋白C端的来自所述UNC‑103蛋白C端第590‑829位氨基酸残基之间，长220‑240个氨基酸残基的片段。还涉及编码所述融合蛋白的多核苷酸序列，相关的转基因线虫，以及相关的筛选方法和应用。本发明人首次构建了一种在体的、可以识别影响hERG胞内运输的化合物分子的筛选方法，筛选hERG抑制剂或长QT综合症(LQTS)相关的通道突变体功能矫正剂，为hERG毒理检测和筛选治疗LQTS药物提供了新的途径和方法。

主权项

一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白含有：作为该融合蛋白N端的来自线虫ERG家族钾离子通道UNC‑103蛋白N端第1～85位氨基酸残基之间，长75～85个、优选78～82个氨基酸残基的片段；hERG或其至少包含S1～S6跨膜区和环状核苷酸结合域的片段；和作为该融合蛋白C端的来自所述UNC‑103蛋白C端第590～829位氨基酸残基之间，长220～240个、优选225～235个氨基酸残基的片段；优选地，所述hERG的氨基酸序列如SEQ ID NO:18所示，和/或所述UNC‑103蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:19所示；优选地，所述融合蛋白还含有报告基因编码的可被检测的蛋白质或酶，如荧光蛋白。