[发明专利]一种果胶酶和纤维素酶磁性复合微球的制备方法

摘要

本发明提供一种果胶酶和纤维素酶磁性复合微球的制备方法，包括有磁性复合微球制备工艺及果胶酶与纤维素固定化工艺。本发明优化了磁性复合微球制备中的各项工艺参数，制得具有超顺磁性、表面有大量羟基和羧基等官能团的载体；应用响应面法优化改进了酶固定化参数，通过京尼平交联后的果胶酶和纤维素酶与载体结合牢固，操作使用性好，酶学性质显著提高。本发明的磁性复合微球固定方法可以使果胶酶与纤维素酶重复多次使用，能够降低原材料和能源消耗，提高投入产出比，从而提高经济效应，实现可持续发展，且二者可同时发挥作用，应用于果汁和蔬菜汁等领域，可提高果蔬出汁率和活性物质提取率，是一项具有重大开发价值的新型技术。

主权项

一种果胶酶和纤维素酶磁性复合微球，其特征在于，所述的磁性复合微球的制备方法如下：1)磁性微球制备：将FeC1₃和FeCl₂用去离子水溶解后置65℃水浴中升温，滴加0.3M氢氧化钠溶液调至pH值为10，于65℃水浴中进行超声混均，将液体置于60℃水浴中搅拌2h，静置冷却至室温，用盐酸中和至中性，再4000r/min高速离心20min，倾去上清液，冷冻干燥，粉碎，过100目筛；得到磁性微球溶液。2)磁性复合微球制备：将6％的阿拉伯胶溶液以20:1的比例加入磁性微球溶液中并乳化1h，将1％的壳聚糖溶液加入阿拉伯胶和磁性微球的乳状液中搅拌2h混合均匀，调节pH为4.5，用京尼平交联6h，获得磁性复合微球溶液。3)磁性复合微球分离干燥：将步骤2)反应后的液体利用高速离心使磁性复合微球与液体分离，倾去上清液，真空冷冻干燥，获得磁性复合微球干粉。