[发明专利]检测小细胞肺癌的靶向纳米微泡及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种检测小细胞肺癌的靶向纳米微泡及其制备方法和应用。靶向纳米微泡包括脂质双分子外壳和包裹在脂质双分子外壳内部的惰性气体，在脂质双分子外壳上连接有针对小细胞肺癌的抗前胃泌素释放肽单克隆抗体，纳米微泡平均粒径在300‑400nm。制备方法：通过薄膜水化法将二棕榈卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈磷脂酸完全溶解于氯仿中制成脂质体，针对小细胞肺癌的抗前胃泌素释放肽单克隆抗体用巯基乙胺打开，与上述脂质体孵育，形成稳定的硫醚键，然后通入全氟丙烷气体,通过机械震荡的方法获得靶向小细胞肺癌的含有抗前胃泌素释放肽单克隆抗体靶向纳米微泡。该靶向纳米微泡可应用于彩色多普勒超声检测小细胞肺癌。

主权项

1.一种检测小细胞肺癌的靶向纳米微泡，包括脂质双分子外壳和包裹在脂质双分子外壳内部的惰性气体，特征在于，在脂质双分子外壳上连接有针对小细胞肺癌的抗前胃泌素释放肽单克隆抗体，纳米微泡平均粒径在300‑400nm；所述的脂质双分子由二棕榈卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈磷脂酸混合制成；所述的惰性气体为全氟丙烷气体；所述的检测小细胞肺癌的靶向纳米微泡的制备方法，包括如下步骤：1)采用薄膜水化法，按质量17‑20:2‑3:1将二棕榈卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈磷脂酸溶解于氯仿中；在通风橱中待氯仿自然挥发形成磷脂薄膜；在磷脂薄膜中加入体积比PBS：甘油＝9：1的水化液，室温下摇床上水化60min形成脂质体；2)取抗前胃泌素释放肽单克隆抗体用PBS‑EDTA稀释；将巯基乙胺溶于PBS‑EDTA中；将上述抗体和巯基乙胺溶液混合，37℃孵育90min，用PBS‑EDTA溶液超滤3次，超滤条件3000rpm，8min，4℃，得到单链抗体；3)将单链抗体与脂质体孵育，4℃过夜，次日用PBS溶液超滤洗涤三次，去除没有链接在脂质体上的单链抗体，用PBS溶液重悬，通入全氟丙烷气体(C3F8)、用银汞胶囊调和器机械震荡45s，静置后弃去上层泡沫，所得乳白色悬液即靶向纳米微泡。