[发明专利]大豆苷元的制备方法有效
申请号: | 201610075795.1 | 申请日: | 2016-01-29 |
公开(公告)号: | CN105647987B | 公开(公告)日: | 2019-01-22 |
发明(设计)人: | 李笑梅;王金凤;杨春华;马慧玲 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨商业大学 |
主分类号: | C12P17/06 | 分类号: | C12P17/06;C12N11/10;C12R1/01 |
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地址: | 150076 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 大豆苷元的制备方法,涉及一种大豆苷元的制备方法。本发明是要解决现有转化方法大豆苷元的转化率,纯度低的问题。方法:一、原料热处理;二、发酵;三、耦合酶解发酵;四、纯化干燥,制得大豆苷元产品。本发明方法是集物理加热、酶解、微生物发酵于一体的复合技术,设备、工艺条件较简单,易于实现,适合工业化生产。而且酶利用率高,产生的废液污染小,易处理。本发明方法的大豆苷元转化率可达到60%~76.8%,制备的产品大豆苷元的纯度可达35%~47.3%。本发明用于制备大豆苷元。 | ||
搜索关键词: | 大豆 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.大豆苷元的制备方法,其特征在于该方法按以下步骤进行:一、原料热处理:对原料进行预处理,预处理的具体方法为炒制,炒制时间为103s,炒制温度为130~140℃;所述原料为大豆异黄酮;二、发酵:将步骤一炒制过的原料加入到BHI液体培养中,然后接入河生肠杆菌LJ‑G1菌液,接种量为5%,发酵条件为:初始pH为7.8~8.2,温度为38~40℃,时间为38~40h;三、耦合酶解发酵:将液态黑曲霉β‑葡萄糖苷酶稀释8000倍后,与质量分数2%的海藻酸钠缓冲溶液混合均匀,然后用注射器缓慢的滴入到质量分数2%的壳聚糖溶液和质量分数2%的CaCl2溶液组成的混合液中,形成微胶囊,然后将其放于4℃硬化2h,再用真空抽滤机进行抽滤,移至体积分数0.2%的戊二醛中,于40~45℃交联1~1.5h,用蒸馏水洗涤3遍,冲去未结合的游离酶以及固定化酶表面的戊二醛,得到海藻酸钠‑壳聚糖‑β‑葡萄糖苷酶‑固定化酶;待步骤二的发酵时间剩余3~4h时,添加固定化酶于发酵液中,进行耦合酶解发酵,初始pH为6.5~7.5、酶解时间为3~4h,得酶解发酵液;四、纯化干燥:将酶解发酵液于3000~3500r/min离心30~40min,取上清液用活性炭进行脱色30~40min,每50mL上清液加入3g活性炭,再经大孔树脂纯化,得到大豆苷元甲醇溶液,旋转蒸发除去溶剂,干燥,制得大豆苷元产品。
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