[发明专利]豆渣水解液高密度酵母工艺

摘要

本发明公开了豆渣水解液高密度酵母工艺，依据现代酶工程技术原理和辅助物理与化学处理技术，采用有针对性的高效酶制剂生物活性物质材料，高效地降解豆渣营养成分为五碳糖、氨基酸，主要作为白酒发酵主要原料。研究降解的最适酶解工艺，为豆渣的高值化利用及后期微生物发酵研究作前提优。

主权项

豆渣水解液高密度酵母工艺，其特征在于，包括以下操作步骤：1)培养基配制：酵母筛选用固体培养基：水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L；酵母驯化用固体培养基；水解液200～700ml/L、硫酸铵5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁1g/L、琼脂20g/L；种子用培养基；水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L；酵母发酵用培养基；水解液200～700ml/L、硫酸铵10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁1g/L；2)种子培养：筛选培养前经两次传代培养后用微量移液枪移取3ml的菌液接种于装有300ml种子培养基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28℃恒温振荡培养。3)生长曲线的测定：取种子培养液于新的发酵液中每隔2小时测吸光度，绘制酵母生长曲线，确定酵母生长的稳定期；4)目标菌株的筛选：选取200ml/L、300ml/L、400lml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L 6个水解液浓度梯度，配制成浓度不同的液体培养基，用微量移液枪逐个接种3ml的处于生长期的种子培养菌液于一系列浓度梯度的培养基中，28℃振荡培养18‑24小时后取菌液稀释平板涂布培养，进一步纯化，重复操作直至筛选出单个菌落，最后即可制备斜面固体培养基保藏菌种，以备后续实验使用；5)选取处于培养至生长期左右的种子培养液，于超净工作台中用微量移液枪分别向配置好的浓度梯度为200ml/L、300ml/L、400lml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L的液体培养基中移取3ml的种子培养液，从而将酵母菌转入液体培养基中，28℃恒温振荡培养18‑24小时。