[发明专利]一种检测核糖核酸酶的方法及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测核糖核酸酶的方法及其试剂盒。本发明提供了一种检测待测样本中核糖核酸酶的方法，包括如下步骤：1)设计合成RNA探针；2)将待测样本和含有所述RNA探针的反应体系混匀，得到反应液；3)检测所述反应液荧光强度，根据荧光强度确定待测样本是否含有核糖核酸酶。本发明的方法优势体现在：1)灵敏度高(0.1pg/ml RNase A，比Ambion高100倍)；2)可实时观测；3)可高通量检测：能同时对大量样本进行检测；反应体积小，成本低，简单快速(1小时左右)，适宜实验室的常规质控；4)广谱性：可检测不同样本中，不同核糖核酸酶的含量和含量；5)安全：不使用任何有害化合物。

主权项

1.一种检测待测样本中核糖核酸酶的非疾病诊断和治疗的方法，包括如下步骤：1）设计合成RNA探针，所述RNA探针如下SEQ1‑ SEQ9任一所示；SEQ1：FAM‑CGUA‑TAMASEQ2：FAM‑AUGCA‑TAMASEQ3：TAMA‑AUGCA‑FAMSEQ4：HEX‑AGCUGA‑BQHSEQ5：HEX‑AGCUGA‑TAMASEQ6：CY3‑GCUAUGCAU‑DabcySEQ7：CY5‑CGAUGCAUGC‑Dabcy1SEQ8：CY5‑AGCUAC‑Dabcy1SEQ9：FAM‑CUGCAU‑BQH其中，A、U、G、C分别代表腺嘌呤核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、胞嘧啶核苷酸；A、C、U分别代表2‑氧甲基腺嘌呤核苷酸，2‑氧甲基胞嘧啶核苷酸，2‑氧甲基尿嘧啶核苷酸；FAM（6‑carboxyfluorescein）为6‑羧基荧光素基团，HEX（5‑hexachlorofluorescein）为5‑六氯荧光素基团，TAMRA（5‑caboxytetramethylrhodamine）为5‑羧基四甲基罗丹明，Dabcy1（4‑(4‑dimethylaminophenylazo)Benzoic acid）为4‑(4‑二甲基氨基苯偶氮基)苯甲酸基团， CY3和CY5为三氢‑吲哚菁型染料，属于花菁染料；2）将待测样本和含有所述RNA探针的反应体系混匀，得到反应液；3）检测所述反应液荧光强度，根据荧光强度确定待测样本是否含有核糖核酸酶。