[发明专利]PD‑1基因重组病毒质粒及构建、重组逆转录病毒Lenti‑PD‑1‑Puro及包装与应用

摘要

本发明公开了一种PD‑1基因重组病毒。该重组病毒Lenti‑PD‑1‑Puro保藏号为CCTCC NoV201601。本发明是通过将PD‑1gRNA序列克隆进逆转录病毒质粒Lenti‑CRISPR/Cas9‑Puro中,得到PD‑1重组病毒质粒Lenti‑CRISPR/Cas9‑PD‑1‑Puro，再将此病毒质粒与质粒pSPAX及pMD2.G共同转染293T细胞，完成重组病毒Lenti‑PD‑1‑Puro的包装。此PD‑1重组病毒感染肿瘤患者外周血的T细胞后成功敲除了T细胞上的PD‑1，解除肿瘤患者T细胞的抑制状态，从而使此种PD‑1重组病毒修饰后的T细胞恢复其攻击肿瘤细胞的能力，达到免疫细胞治疗的作用。

主权项

一种PD‑1基因重组病毒质粒，属逆转录病毒质粒，命名为慢病毒载体KGEN‑0626，于2016年1月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：V201601，其序列为SEQ ID NO：1。