[发明专利]一种测定三尖杉科植物中三尖杉生物碱总碱含量的方法

摘要

本发明公开了一种测定三尖杉科植物中三尖杉生物碱总碱含量的方法，包括以下步骤：(1)选取三尖杉碱标准品，加入变色酸溶液、浓磷酸和过氧化氢，摇匀后微波加热，得标准品反应液；(2)将标准品反应液冷却至室温，定容，并比色，将比色得到的吸光值与步骤(1)中的三尖杉碱标准溶液的浓度相关联，建立三尖杉碱吸光度值‑浓度的标准曲线；(3)选取三尖杉科植物样品或三尖杉科植物的悬浮培养细胞，提取其中的三尖杉生物碱总碱，(4)参照步骤(2)、(3)，测其吸光值，将测得的吸光值代入上述吸光度值‑浓度的标准曲线，获得三尖杉科植物样品的浓度，经换算即获得三尖杉科植物样品中三尖杉生物碱总碱含量。该方法简便、安全、快捷、准确。

主权项

1.一种测定三尖杉科植物中三尖杉生物碱总碱含量的方法，其特征是包括以下步骤：（1）选取三尖杉碱标准品，采用有机溶剂配制一组具有浓度梯度的三尖杉碱标准溶液，将该组具有浓度梯度的三尖杉碱标准溶液挥干有机溶剂，然后加入变色酸溶液、浓磷酸和过氧化氢，摇匀后微波加热，得标准品反应液；（2）将标准品反应液冷却至室温，加入蒸馏水定容，并比色，将比色得到的吸光值与步骤（1）中的三尖杉碱标准溶液的浓度相关联，建立三尖杉碱吸光度值‑浓度的标准曲线；（3）选取三尖杉科植物样品，烘干后粉碎，获得生药粉末，取生药粉末，加入氨水，混匀后再加入氯仿浸提，浸提结束后过滤、离心，取氯仿层，挥发掉氯仿，残留物用有机溶剂定容；或选取三尖杉科植物的悬浮培养细胞，离心后，取沉淀物，加入氨水，混匀后再加入氯仿，搅拌后超声处理，浸泡过夜浸提，浸提结束后过滤，取滤液，并挥发掉氯仿，残留物用有机溶剂定容；（4）取定容后样品，挥发干有机溶剂，加入变色酸溶液、浓磷酸和过氧化氢，摇匀后微波加热，冷却至室温，加入蒸馏水定容，并比色，将测得的吸光值代入步骤（2）建立的三尖杉碱吸光度值‑浓度的标准曲线，获得三尖杉科植物样品的浓度，经换算即获得三尖杉科植物样品中三尖杉生物碱总碱含量；步骤（1）和步骤（3）中所述的有机溶剂为甲醇；步骤（1）和步骤（4）中微波加热时，微波功率为1000~1200W，加热时间为30~38s；步骤（2）和步骤（4）中比色时，于波长558nm处比色。