[发明专利]一种玉米穗腐病病原物的双重PCR检测方法在审
| 申请号： | 201610093209.6 | 申请日： | 2016-02-19 |
| 公开（公告）号： | CN105543392A | 公开（公告）日： | 2016-05-04 |
| 发明（设计）人： | 施艳;李洪连;王振跃;袁虹霞;陈琳琳;孙炳剑;邢小萍 | 申请（专利权）人： | 河南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人： | 张绍琳;张真真 |
| 地址： | 450002 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于生物分子技术领域，涉及一种快速灵敏检测技术，具体涉及一种玉米穗腐病病原物的双重PCR检测方法。具体步骤为：（1）真菌菌丝的收集；（2）真菌DNA的提取；（3）PCR扩增：PCR反应总体系为，禾谷镰刀菌引物FvCal58-F/FvCal240-R和拟轮枝镰刀菌引物Fg16N-F/Fg16N-R各1μL，2×r-taq Master mix 5μL，模板DNA 1μL，灭菌双蒸馏水补足到10μL；双重PCR反应程序为94℃预变性5min；94℃变性30s，54℃退火30s，72℃延伸20s，共35个循环；72℃延伸10min。本发明利用双重PCR建立的同时检测方法，经济实惠，大幅节约实验室时间和检测成本，可在实际生产中应用检测，为田间引起玉米穗腐病的病原的快速检测奠定了基础，有利于提前对玉米穗腐病进行防治。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 玉米 穗腐病病 原物 双重 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种玉米穗腐病病原物的双重PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）真菌菌丝的收集；（2）真菌DNA的提取；（3）PCR扩增：PCR反应总体系为，禾谷镰刀菌引物FvCal58‑F/FvCal240‑R和拟轮枝镰刀菌引物Fg16N‑F/Fg16N‑R各1 μL，2 × r‑taq Master mix 5 μL，模板DNA 1 μL，灭菌双蒸馏水补足到10 μL；双重PCR反应程序为94℃预变性5 min；94℃变性30 s，54℃退火30 s，72℃延伸20 s，共35个循环；72℃延伸10 min。
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