[发明专利]间日疟原虫烯醇化酶的制备及其应用在审
| 申请号： | 201610099144.6 | 申请日： | 2016-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN105543203A | 公开（公告）日： | 2016-05-04 |
| 发明（设计）人： | 张超;顾亚萍;唐建霞;曹俊;高琪 | 申请（专利权）人： | 江苏省血吸虫病防治研究所 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;A61P33/06 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 殷红梅;涂三民 |
| 地址： | 214064 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种间日疟原虫烯醇化酶的制备及其应用，特征是，包括以下步骤：（1）扩增间日疟原虫烯醇化酶（enolase）基因：提取间日疟原虫基因组，采用引物P2和引物P3扩增第一段enolase基因，然后再以第一段enolase基因为模版，以引物P1和引物P3扩增出enolase基因；（2）构建pET28α/enolase表达载体；（3）重组enolase蛋白表达和纯化：将pET28α/enolase表达载体转化到BL-21（DH3）pLys感受态细菌上，培养后的细菌进行诱导、纯化。本发明能够简便的大量制备间日疟原虫烯醇化酶，并实现抑制疟原虫生长的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 间日 疟原虫 醇化 制备 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种间日疟原虫烯醇化酶的制备，其特征是，包括以下步骤：（1）扩增间日疟原虫烯醇化酶（enolase）基因：提取间日疟原虫基因组，采用引物P2和引物P3扩增第一段enolase基因，然后再以第一段enolase基因为模版，以引物P1和引物P3扩增出enolase基因；（2）构建pET28α/ enolase表达载体：a、纯化步骤（1）得到的enolase基因；b、将pET28α 质粒酶切、提纯得到线性化的pET28α 质粒载体；c、将线性化的pET28α质粒载体和enolase基因连接，得到pET28α/ enolase表达载体；（3）重组enolase蛋白表达和纯化：将pET28α/ enolase表达载体转化到BL‑21（DH3）pLys感受态细菌上，培养后的细菌进行诱导、纯化。
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