[发明专利]一种童康片的质量检测方法

摘要

本发明公开了一种童康片的质量检测方法，童康片的原材料组成为黄芪80.5g、白术53.5g、防风27g、山药80.5g、陈皮6.5g、牡蛎80.5g，其质量检测方法包括性状、鉴别、检查、指纹图谱测定和含量测定，其中鉴别是采用薄层色谱法对童康片中的黄芪、白术、防风、陈皮进行鉴别，指纹图谱测定是通过高效液相色谱法测定童康片中的橙皮苷成分的指纹图谱，含量测定为采用高效液相色谱法同时对童康片中的升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、5‑O‑甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷进行含量测定；本发明的质量检测方法具有快速、稳定、准确等优点，本发明为童康片的生产和使用提供了一套标准的检测方法，可有效保证童康片在生产和使用过程的质量，从而保证药品疗效。

主权项

一种童康片的质量检测方法，童康片的原材料组成为：黄芪80.5g、白术53.5g、防风27g、山药80.5g、陈皮6.5g、牡蛎80.5g，其特征在于，其质量检测方法包括性状、鉴别、检查、指纹图谱测定和含量测定，其中鉴别是采用薄层色谱法对童康片中的黄芪、白术、防风、陈皮进行鉴别，所述鉴别包括：(1)薄层色谱法鉴别黄芪：取童康片适量，去糖衣，精密称取10g，加入适量硅藻土，研细，加入甲醇300mL，加热回流20min，过滤，滤液蒸干，残渣加水50mL使溶解，用二氯甲烷振摇萃取3次，每次50mL，弃去二氯甲烷溶液，水溶液用水饱和正丁醇振摇萃取3次，每次50mL，合并正丁醇液，用浓氨水洗涤3次，每次50mL，分取浓氨水液备用，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL溶解，过D101型大孔树脂柱，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇80mL洗脱，弃去洗脱液，再以70％乙醇100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材粉末3g，加甲醇20mL，加热回流1h，蒸干，残渣加水30mL溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，以1％氢氧化钠溶液洗涤2次，每次30mL，弃去碱洗液，正丁醇液再以正丁醇饱和水溶液50mL洗涤1次，弃去水溶液，正丁醇液蒸干，残渣以甲醇1mL溶解，作为黄芪对照药材溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成1mg/mL的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液4μL、对照药材溶液4μL、对照品溶液8μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以11:8:3的氯仿‑甲醇‑水的下层溶液为展开剂，展开、取出、晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱、对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；波长为365nm的紫外灯下显相同的橙黄色荧光斑点；(2)薄层色谱法鉴别陈皮：取(1)中备用的浓氨水液，加稀盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取3次，每次400mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2mL溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材粉末0.3g，加甲醇10mL，加热回流20min，过滤，取滤液5mL，浓缩至2mL，作为对照药材溶液；另取陈皮苷对照品，加甲醇制成1mg/mL的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液3μL、对照药材溶液1μL、对照品溶液7μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以100：17：10的乙酸乙酯‑甲醇‑水为展开剂，展开、取出、晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)薄层色谱法鉴别防风：取童康片适量，除去糖衣，加适量硅藻土，研细，取10g，置磨口锥形瓶中，加丙酮200ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为童康片供试品溶液；另取防风对照药材粉末1g，置磨口锥形瓶中，加丙酮20ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；另取升麻素苷对照品、5‑O‑甲基维斯阿米醇苷对照，分别加甲醇制成1mg/ml的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20μl、对照药材溶液2μl、对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以4:1的三氯甲烷‑甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为254nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)薄层色谱法鉴别白术：取童康片适量，除去糖衣，加适量硅藻土，研细，置磨口锥形瓶中，加5:1的醋酸乙酯‑无水乙醇混合溶液30mL，水浴加热回流1小时，放冷，过滤；滤液加活性炭0.2g，在水浴上搅拌5min，过滤，滤液蒸干；残渣加无水乙醇0.5mL溶解，作为供试品溶液；另取白术对照药材1g，方法同上制成对照药材溶液；照中药部颁标准规定的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液及阴性供试品溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:1的甲苯‑醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对二甲氨基苯甲醛溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；所述的含量测定为采用高效液相色谱法同时对童康片中的升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、5‑O‑甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷进行含量测定，测定步骤如下：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基键和硅胶为填充剂；流动相体系：乙腈‑0.1％甲酸水溶液；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％甲酸，按洗脱条件进行梯度洗脱，流速为1ml/min，柱温25℃，检测波长为200‑400nm；理论板数按橙皮苷计算应不低于2000；其中，所述洗脱条件为：对照品溶液的制备：精密称取升麻素苷标准品3.96mg、毛蕊异黄酮葡萄糖苷2.94mg、5‑O‑甲基维斯阿米醇苷3.25mg、橙皮苷9.19mg置25ml容量瓶中，加甲醇溶解、定容到刻度，作为储备液；从中吸取5ml到10ml量瓶中，加甲醇定容到刻度，作为对照品溶液1；从对照品溶液1中吸取1ml到2ml量瓶中，加甲醇定容到刻度，作为对照品溶液2；供试品溶液的制备：取适量童康片，研细，取约4g，精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入20ml甲醇，称定重量，采用加热回流方式提取60min，提取1次，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液；测定法：分别精密吸取对照品溶液1、对照品溶液2与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。