[发明专利]一种纯化戈那瑞林的方法在审
申请号: | 201610102107.6 | 申请日: | 2016-02-25 |
公开(公告)号: | CN105646671A | 公开(公告)日: | 2016-06-08 |
发明(设计)人: | 徐红岩;秦敬国 | 申请(专利权)人: | 吉尔生化(上海)有限公司;上海吉尔多肽有限公司 |
主分类号: | C07K7/23 | 分类号: | C07K7/23;C07K1/20 |
代理公司: | 上海浦东良风专利代理有限责任公司 31113 | 代理人: | 张劲风 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明的目的在于提供一条适于大规模工业化生产的纯化戈那瑞林的方法,主要解决该产品生产过程中粗肽纯度低,产品不易控制、收率不高等问题。本发明的技术方案为:戈那瑞林经SPE柱和反相色谱柱进行梯度洗脱纯化,得到较高纯度的戈那瑞林馏分,然后采用HPLC转盐法转盐,减压旋蒸、浓缩、冷冻、干燥得到醋酸戈那瑞林。本发明用于工业化纯化戈那瑞林。 | ||
搜索关键词: | 一种 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种纯化戈那瑞林的方法,其特征在于包括以下步骤:1) 将戈那瑞林粗品先经SPE柱进行梯度洗脱纯化:先用体积百分比10%乙腈+体积百分比0.1%三氟乙酸水溶液洗脱,然后用体积百分比40%乙腈+体积百分比0.1%三氟乙酸水溶液洗脱,收集目的峰值的肽溶液;2) 将步骤1)中收集的目标肽溶液经反相高效液相色谱柱进行梯度洗脱纯化:流动相A为体积百分比0.01‑0.5%磷酸水溶液,流动相B为色谱级乙腈,梯度洗脱为B%:15%‑55%,收集目标峰的肽溶液;3)将目标峰肽溶液利用HPLC转盐法转盐:流动相A为体积百分比0.05‑0.3%醋酸水溶液,流动相B为色谱级乙腈,梯度为5%的恒梯度冲洗10‑25分钟,然后用醋酸水溶液和乙腈体系洗脱,洗脱梯度为10%‑70%,收集醋酸戈那瑞林肽溶液;4)减压旋蒸上述肽溶液浓缩冷冻干燥得到醋酸戈那瑞林。
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