[发明专利]一种乌桕成熟胚乳离体直接再生植株的方法有效
申请号: | 201610115535.2 | 申请日: | 2016-03-01 |
公开(公告)号: | CN105706931B | 公开(公告)日: | 2018-02-13 |
发明(设计)人: | 侯金艳;吴丽芳;赵华 | 申请(专利权)人: | 中国科学院合肥物质科学研究院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙)34124 | 代理人: | 丁瑞瑞 |
地址: | 230000 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开一种乌桕成熟胚乳离体直接再生植株的方法,包括如下步骤(1)取乌桕成熟种子剪去种壳,经表面消毒后接种于添加生长调节剂的启培养基中,光照,进行胚乳启动培养;(2)把胚乳从乌桕种子上剥离,接种于不定芽诱导培养基中,光照,进行不定芽的诱导,获得嫩绿不定芽丛;(3)将不定芽丛切块,转接于增殖和伸长培养基中进行不定芽的增殖和伸长;(4)转入生根培养基进行生根,获得健壮的乌桕再生植株。本发明具有再生过程简单,不经过愈伤组织的诱导阶段,可以在胚乳周边表皮直接诱导出不定芽丛的优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 乌桕 成熟 胚乳 直接 再生 植株 方法 | ||
【主权项】:
一种乌桕成熟胚乳离体直接再生植株的方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)取乌桕成熟种子剪去种壳,经表面消毒后接种于添加有2.0~8.0mg/L 6‑BA、0.2~1.0mg/L TDZ、30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂的MS培养基中,光照,进行胚乳启动培养;其中,表面消毒是指在无菌操作台中,用75%的无水乙醇消毒30~45s,之后用20%的次氯酸钠溶液消毒8~12min,无菌水冲洗3~5遍,之后再经600W超声处理7~10min,种子表面消毒期间不停地摇动;(2)预培养6~9d,把胚乳从处于萌动状态的乌桕种子上剥离,接种于添加有3.0~6.0mg/L 6‑BA、0.05~0.5mg/L TDZ、30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂的MS培养基中,光照,进行不定芽的诱导,获得嫩绿不定芽丛;(3)将不定芽丛切块,转接于添加有1.0~2.0mg/L 6‑BA、0.05~0.1mg/L TDZ、30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂的MS培养基中进行不定芽的增殖和伸长;(4)转入添加有0.3mg/L IBA的1/4MS固体生根培养基进行生根,获得健壮的乌桕试管苗,驯化后进行移栽。
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