[发明专利]一种制备肠道粘膜损伤动物模型的方法及其用途在审

专利信息
申请号: 201610116025.7 申请日: 2016-03-01
公开(公告)号: CN107137388A 公开(公告)日: 2017-09-08
发明(设计)人: 刘杰;潘亦达;张会禄;张骏 申请(专利权)人: 复旦大学附属华山医院
主分类号: A61K31/198 分类号: A61K31/198;A61K49/00;A01K67/027
代理公司: 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 代理人: 吴桂琴
地址: 200031 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及医疗评价、检测技术领域,具体涉及一种制备肠道粘膜损伤动物模型的方法及其用途。本发明采用水溶性好,灌胃操作方便简单的药物L-MSO,方便稳定地诱导出小鼠肠道粘膜损伤,并引起相应组织病理学改变和炎性因子变化,本发明的制备方法从代谢损伤方向明显区别现有技术的诱导免疫损伤的造模方向制得肠道粘膜损伤动物模型,尤其,采用低浓度L-MSO制备一般损伤模型,其中,实验小鼠肠道粘膜轻-中度的损伤;采用高浓度L-MSO制备严重损伤模型,其中,实验小鼠肠道粘膜重度损伤;制得的肠道粘膜损伤模型对炎症性肠病的研究和实践具有重大价值。
搜索关键词: 一种 制备 肠道 粘膜 损伤 动物 模型 方法 及其 用途
【主权项】:
一种制备肠道粘膜损伤动物模型的方法,其特征在于,采用药物L‑蛋氨酸砜亚胺L‑MSO从代谢损伤角度诱导制备肠道粘膜损伤动物模型,其包括步骤:1)使用SPF级C56BL/6的6‑8周龄小鼠为实验动物,设L‑MSO高浓度组和L‑MSO低浓度组;2)L‑MSO高浓度组诱导肠道严重的持续性损伤,工作浓度为100mg/kg,每隔一天灌胃给药,给药持续一周;3)L‑MSO低浓度组诱导肠道轻中度的损伤,工作浓度为25mg/kg,每隔一天灌胃给药,给药持续一周;4)实验期间,每天观察小鼠的应激、活动减少的大体情况,并按所规定的指标观察,同时进行疾病活动度(DAI)评分;5)动物肠道评价及组织样本收集;6)HE染色和组织病理学评分;7)EILISA检测小鼠结肠组织匀浆中的炎性因子表达水平,并使用总蛋白BCA蛋白定量作为调平依据;8)内源性谷氨酰胺和谷氨酰胺合成酶检测检测小鼠结肠粘膜提取物中的谷氨酰胺及谷氨酰胺合成酶的表达水平;9)MPO检测邻联二茴香胺氧化法测定MPO活性。
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