[发明专利]一种分离尿液中外泌体的方法在审
申请号: | 201610117071.9 | 申请日: | 2016-03-02 |
公开(公告)号: | CN107153023A | 公开(公告)日: | 2017-09-12 |
发明(设计)人: | 李辉辉;王家亮;刘月星;叶晓飞;俞京仁 | 申请(专利权)人: | 上海润腾生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N1/40 | 分类号: | G01N1/40 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200233 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供一种简单快速高效的尿液外泌体分离的方法,该方法包括S1.收集尿液,离心,保留上清液(SN1);S2.使用二硫苏糖醇处理底部沉淀;S3. 处理后的混合液经离心获得上清(SN2),与第一次得到的上清SN1混合;S4.将特定体积的商业化外泌体沉淀试剂加入到总的上清液中(SN1+SN2),混匀后在4℃孵育至少12个小时;S5. 将上清与外泌体沉淀试剂混合液离心,在管底得到可见的外泌体沉淀;S6. 加入磷酸盐缓冲液重悬外泌体沉淀。与其他尿液外泌体分离的方法相比,该方法能够从尿液中获得最大数量的外泌体颗粒,同样也能产生较高数量及更优质量的外泌体miRNA或mRNA。 | ||
搜索关键词: | 一种 分离 尿液 中外 方法 | ||
【主权项】:
一种分离尿液中外泌体的方法,其特征在于,包括步骤:S1、收集尿液,离心,保留上清液(SN1);S2、使用二硫苏糖醇(DTT)处理底部沉淀;S3、处理后的混合液经离心获得上清(SN2),与第一次得到的上清SN1混合;S4、将特定体积的商业化外泌体沉淀试剂加入到总的上清液中(SN1+SN2),混匀后在4℃孵育至少12个小时;S5、将上清与外泌体沉淀试剂混合液离心,在管底得到可见的外泌体沉淀;S6、加入磷酸盐缓冲液重悬外泌体沉淀。
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