[发明专利]一种非洲猪瘟P30蛋白重组杆状病毒表达载体及其制备方法有效
申请号: | 201610118546.6 | 申请日: | 2016-03-02 |
公开(公告)号: | CN105647971B | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 单虎;王玉英;于泽坤;秦志华;张洪亮;黄娟 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | C12N15/866 | 分类号: | C12N15/866;C12N15/66 |
代理公司: | 北京冠和权律师事务所 11399 | 代理人: | 李建华 |
地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了一种非洲猪瘟P30蛋白重组杆状病毒表达载体及其制备方法,其是从含ASFVP30全长基因的质粒PCR‑4TOPO‑P30中扩增出P30基因,将扩增的P30基因连接至杆状病毒载体pFastBac 1中,构建重组杆状病毒载体pFastBac1‑ASFV‑P30,转化至大肠杆菌感受态细胞DH10Bac中,获得重组穿梭杆粒rBacmid‑ASFV‑P30,鉴定正确后将其转染至Sf 9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,并将重组杆状病毒进行传代扩增,将高滴度的含有ASFV P30基因的杆状病毒接到High Five昆虫细胞中进行ASFV P30蛋白的真核表达。选用本发明方法构建非洲猪瘟P30蛋白重组杆状病毒表达载体,并利用重组杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达非洲猪瘟P30蛋白,为非洲猪瘟血清学ELISA检测方法的建立奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 非洲 猪瘟 p30 蛋白 重组 杆状病毒 表达 载体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种非洲猪瘟P30蛋白重组杆状病毒表达载体,其特征在于该重组杆状病毒表达载体的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。
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