[发明专利]一种生产3-羟基丙酸的重组大肠杆菌及应用

摘要

本发明公开了一种生产3‑羟基丙酸的重组大肠杆菌及应用，所述重组大肠杆菌是将甘油脱水酶基因dhaB123、甘油脱水酶再激活因子基因gdrA、α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh和甘油三磷酸脱氢酶编码基因gpd1导入宿主菌中构建而成；通过利用基因敲除技术解除甘油进出细胞的抑制，同时再生醛脱氢酶的辅因子NAD⁺，从而提高3‑HP产量，提高了12倍。

主权项

1.一种生产3‑羟基丙酸的重组大肠杆菌，其特征在于所述重组大肠杆菌是将甘油脱水酶基因dhaB123、甘油脱水酶再激活因子基因gdrA、α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh和甘油三磷酸脱氢酶编码基因gpd1导入宿主菌中构建而成；所述宿主菌为敲除甘油抑制因子基因glpR的大肠杆菌，所述α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体是将SEQ ID NO.2所示α‑酮戊二酸半醛脱氢酶的120位谷氨酸突变为天冬氨酸，219位脯氨酸突变为丙氨酸获得的；所述甘油脱水酶基因dhaB123和甘油脱水酶再激活因子基因gdrA的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，所述α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示，所述甘油三磷酸脱氢酶编码基因gpd1的核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示。