[发明专利]一种过氧化氢酶的制备方法

摘要

本发明公开了一种过氧化氢酶的制备方法，属于过氧化氢制备技术领域。本发明以豆腐为原料，首先向其中加入氢氧化氢溶液和磷酸混合均匀，随后将混合物中倒入调酒液，并用氮气排出空气，发酵后收集发酵物表面菌丝，之后收集得到的发酵物菌丝放入培养基中，振荡培养，并倒入猪皮表面，再次进行发酵处理，最后将得到的发酵物取出，离心后，喷雾干燥，收集干燥物，从而得到过氧化氢酶的制备方法。实例证明，本发明操作简便，在制备的过程中避免了无机盐的使用，对于环境无任何二次污染，不仅制得的过氧化氢酶的活性高，而且制得的过氧化氢酶为干品，更好稳定，具有更好的缓释作用。

主权项

 一种过氧化氢酶的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）称取2～4kg豆腐放入搅拌机中搅拌成浆状物，再将其放入烧杯，分别向其中加入600～800mL质量分数为30％的氢氧化氢溶液和200～400mLpH为6.5的磷酸缓冲液，搅拌均匀，把烧杯移至微波炉中，频率为80～90Hz，温度为40～50℃，保持温度5～8min；（2）待上述保温结束后，向烧杯中加入120～140mL调酒液，搅拌均匀后密封烧杯，使用氮气将烧杯中的空气排出，控制温度为35～40℃，以150r/min搅拌发酵4～6天后，停止搅拌静置发酵2～3天，收集发酵物表面的菌丝；（3）按重量百份比计，取40～45份蛋白膏、10～15份血粉、5～10份琼脂、20～25份质量分数为20％的过氧化氢溶液及10～20份葡萄糖，搅拌均匀，形成培养基，将上述收集的发酵物表面的菌丝放入培养基中，随后将培养基放置于振荡培养箱中，在35～40℃下，以振荡频率200～300rpm，振荡培养2～3天；（4）取猪皮放入容器中，向其中加入质量分数为5％的盐酸溶液浸泡猪皮，浸泡时间30～40min后将猪皮取出，使用刀将猪皮外表面的猪毛去除干净，再将内表面的肉质去除，再将上述培养结束后的培养混合物倒在猪皮内表面，随后将猪皮移至发酵罐；（5）设定上述发酵罐温度为35～40℃，发酵4～6天，每4～6h以4mL/min通入空气，通气时间5～7min，待发酵结束后将发酵物取出，把发酵混合物放入离心机中，以500～700r/min进行离心分离，收集上清液，将上清液放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到过氧化氢酶。