[发明专利]抗羊IgMμ链单克隆抗体、分泌该抗体的杂交瘤细胞株及其用途有效
申请号: | 201610136665.4 | 申请日: | 2016-03-09 |
公开(公告)号: | CN107177556B | 公开(公告)日: | 2020-12-11 |
发明(设计)人: | 蒙学莲;朱学亮;窦永喜;才学鹏;张志东 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/42;G01N33/577;C12R1/91 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;马鑫 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明公开了抗羊IgMμ链单克隆抗体、分泌该抗体的杂交瘤细胞株及其用途。本发明以分泌型IgM蛋白为靶蛋白,克隆获得IgMμ链基因的完整开放阅读框,亚克隆至原核表达载体,利用镍柱纯化重组蛋白,并对6‑8周龄的雌性BALB/c小鼠进行免疫,当抗体滴度在1∶10000以上时,对免疫小鼠脾细胞的单细胞悬液与对数生长期的骨髓瘤细胞进行融合,筛选获得分泌抗羊IgMμ链的单克隆抗体的杂交瘤细胞株;向6‑8周龄的经产BALB/c小鼠腹腔注射杂交瘤细胞,注射7天左右收集腹水,protein G/A琼脂糖珠纯化腹水,获得纯度较高的抗羊IgMμ链的单克隆抗体。本发明提供的单克隆抗体效价高,可用于羊IgM免疫球蛋白的检测,并且有望实现对多种羊病的早期筛查与监测,具有广泛的应用范围和社会需求。 | ||
搜索关键词: | 抗羊 igm 单克隆抗体 分泌 抗体 杂交瘤 细胞株 及其 用途 | ||
【主权项】:
一株能够稳定分泌抗羊型IgMμ链单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为5D1,其特征在于所述的杂交瘤细胞株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其菌种保藏编号为:CGMCC No.11283。
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