[发明专利]一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法在审
| 申请号： | 201610142392.4 | 申请日： | 2016-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN105586388A | 公开（公告）日： | 2016-05-18 |
| 发明（设计）人： | 洪军;耿方勇;肖保林 | 申请（专利权）人： | 河南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/54 | 分类号： | C12Q1/54;C12Q1/28;C12Q1/26 |
| 代理公司： | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人： | 刘建芳;杨海霞 |
| 地址： | 475001*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法，具体为：1）配置pH值为5.8的磷酸盐缓冲液，然后室温下依次加入辣根过氧化物酶液、葡萄糖氧化酶液、愈创木酚和葡萄糖溶液；2）采用紫外可见光分光光度计进行时间扫描，获得产物四邻甲氧基连酚的吸光值随时间的变化数据；3）根据朗伯比尔定律将四邻甲氧基连酚的吸光值换算为浓度，然后以时间为横坐标，浓度为纵坐标，在excel中作散点图，添加趋势线，趋势线斜率即为四邻甲氧基连酚的生成速率，该生成速率乘以系数4即得到葡萄糖氧化酶催化葡萄糖的反应速率，再根据酶活力单位定义进行换算即得到葡萄糖氧化酶酶活性。该方法具有操作简便，反应现象明显，灵敏度高，重复性好等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄糖 氧化酶 活性 测量方法 | ||
【主权项】：
一种葡萄糖氧化酶酶活性的测量方法，其特征在于，包括如下步骤：1）配置pH值为5.8的磷酸盐缓冲液，然后室温下依次加入辣根过氧化物酶液、葡萄糖氧化酶液、愈创木酚溶液和葡萄糖溶液；2）当加入葡萄糖后酶促反应开始，此时开始计时，在吸收波长为470nm条件下采用紫外可见光分光光度计进行时间扫描，获得产物四邻甲氧基连酚的吸光值随时间的变化数据；3）根据朗伯比尔定律将四邻甲氧基连酚的吸光值换算为浓度，然后以时间为横坐标，浓度为纵坐标，在excel中作散点图，添加趋势线，趋势线斜率即为四邻甲氧基连酚的生成速率，该生成速率乘以系数4即得到葡萄糖氧化酶催化葡萄糖的反应速率，再根据酶活力单位定义进行换算即得到葡萄糖氧化酶酶活性。
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