[发明专利]一种DC细胞的制备方法

摘要

本发明涉及细胞制备领域，具体涉及一种DC细胞的制备方法，取出冻存的PBMC细胞在37℃的水浴中快速摇晃，使其融化；用GT‑T551无血清培养基调整单个核淋巴细胞浓度，然后将调整好浓度的单核淋巴细胞以2‑4mL/孔加入六孔板中，贴壁1‑2小时，最后吸弃六孔板的每个孔内的上层未贴壁细胞；在六孔板的每个孔内分别加入DC培养基培养，在补充加入诱导DC细胞的混合因子后继续培养22‑26小时；补充加入诱导DC成熟的因子后再培养22‑26小时。本发明提供的DC细胞的制备方法非常便捷，DC细胞制备的时间和规模都能很好的得以控制，而且配制的DC细胞的质量可控，DC细胞活力和纯度都非常高。

主权项

一种DC细胞的制备方法，其步骤包括，(1)、取出冻存的PBMC细胞在37℃的水浴中快速摇晃，使其融化；(2)、用GT‑T551无血清培养基调整单个核淋巴细胞浓度为2×10⁵‑2×10⁷个/mL，然后将调整好浓度的单核淋巴细胞以2‑4mL/孔加入六孔板中，贴壁1‑2小时，最后吸弃六孔板的每个孔内的上层未贴壁细胞；(3)、在六孔板的每个孔内分别加入DC培养基2‑4mL，置于二氧化碳培养箱内，二氧化碳浓度为5％，温度为37％，培养45‑50小时；(4)、在六孔板的每个孔内补充加入诱导DC细胞的混合因子0.05‑0.1mL后继续培养22‑26小时；(5)、在六孔板的每个孔内补充加入诱导DC成熟的因子0.08‑0.16mL后再培养22‑26小时。