[发明专利]一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法有效
| 申请号： | 201610146280.6 | 申请日： | 2014-08-08 |
| 公开（公告）号： | CN105647835B | 公开（公告）日： | 2019-01-08 |
| 发明（设计）人： | 方柏山;任红;王世珍 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12P13/22;C12R1/07 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人： | 马应森 |
| 地址： | 361005 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法，涉及手性苯丙氨酸。将菌种接入2216L培养基中培养，得发酵液，离心获得细胞，用缓冲液重悬、洗涤，配制成细胞液；所述菌种为南海芽孢杆菌(Bacillus nanhaiensis)DSF‑15A2，保藏中心登记入册编号为CGMCC No.8969；在细胞液中，加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物，再加入辅助底物用于辅酶循环再生，反应后得到含有产物L‑苯丙氨酸的反应液，离心去除沉淀，上清液加入等量的甲醇，震荡混合均匀，离心去除沉淀，上清液稀释后进行测定，苯丙酮酸的浓度用高效液相色谱检测，产物L‑苯丙氨酸的浓度和对映体过量值用高效液相色谱测定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 海洋 菌株 催化 不对称 还原 制备 手性 苯丙氨酸 方法 | ||
【主权项】：
1.一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法，其特征在于包括以下步骤：1)细胞液制备：将菌种接入2216L培养基中培养，得发酵液，离心获得细胞，用缓冲液重悬、洗涤，配制成细胞液；所述菌种为南海芽孢杆菌(Bacillus nanhaiensis)DSF‑15A2，所述南海芽孢杆菌(Bacillus nanhaiensis)DSF‑15A2已于2014年03月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏中心登记入册编号为CGMCC No.8969；2)全细胞催化反应：在步骤1)得到的细胞液中，加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物，再加入辅助底物用于辅酶循环再生，反应后得到含有产物L‑苯丙氨酸的反应液；3)分离与检测：将步骤2)得到的含有产物L‑苯丙氨酸的反应液离心去除沉淀，上清液加入等量的甲醇，震荡混合均匀，离心去除沉淀，上清液稀释后进行测定，苯丙酮酸的浓度用高效液相色谱检测，产物L‑苯丙氨酸的浓度和对映体过量值用高效液相色谱测定，所述沉淀为蛋白质。
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