[发明专利]一种CIK淋巴细胞的扩增激活方法

摘要

本发明公开了一种使用转染功能蛋白质的宿主细胞,联合多种蛋白质扩增激活CIK细胞的方法。本发明的优点是与现有的方法相比，本发明扩增和激活的CIK细胞的纯度更高、扩增效率更高、杀伤肿瘤和肿瘤微环境中TAMs的能力更强。本发明在控制和缓解部分疾病的进展,如癌症、传染性疾病、糖尿病、或器官移植和乙肝方面具有广阔的前景。

主权项

1.一种CIK淋巴细胞的扩增激活方法，其特征在于，使用转染了蛋白质A、蛋白质B、蛋白质C、蛋白质D、蛋白质E、蛋白质F的宿主细胞，联合蛋白质A1、蛋白质B1、蛋白质C1、蛋白质D1共同对淋巴细胞进行扩增激活，得到CIK淋巴细胞；所述蛋白质A包含CD8α的功能片段和白介素21的功能片段；蛋白质B包含CD14的功能片段；蛋白质C包含CD19的功能片段；蛋白质D包含CD86的功能片段；蛋白质E 包含CD163的功能片段；蛋白质F包含CD137L的功能片段；蛋白质A1包含白介素2的功能片段、蛋白质B1包含IL-1α的功能片段、蛋白质C1包含IFN-γ的功能片段、蛋白质D1包含CD3 mAb的功能片段；具体步骤为：/n（1）对转染了蛋白质A、蛋白质B、蛋白质C、蛋白质D、蛋白质E、蛋白质F的宿主细胞进行辐照致死处理；/n（2）在含有淋巴细胞的培养液中，加入步骤（1）处理后的宿主细胞、以及蛋白质A1、蛋白质B1、蛋白质C1、蛋白质D1共同培养7天；所述的蛋白质A、蛋白质B、蛋白质C、蛋白质D、蛋白质E、蛋白质F的量均为50pM-1000pM；蛋白质A1、蛋白质B1、蛋白质C1的量均为10-1000IU/毫升，蛋白质D1的量为10-1000纳克/毫升；/n（3）经培养后，辐照后的宿主细胞破裂，将培养后的培养液离心，获取存活的淋巴细胞沉淀，并用培养液重悬；/n（4）加入辐照处理后的宿主细胞，培养7天；经培养后，辐照后的宿主细胞破裂，将培养后的培养液离心，获取存活的淋巴细胞沉淀，即得到CIK淋巴细胞；/n其中，所述培养液由100体积的1640培养液和10体积的胎牛血清组成。/n