[发明专利]表达J亚群禽白血病病毒Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用有效

专利信息
申请号: 201610147336.X 申请日: 2016-03-15
公开(公告)号: CN105695422B 公开(公告)日: 2019-12-10
发明(设计)人: 李凯;高玉龙;王笑梅;刘长军;张艳萍;崔红玉;高立;祁小乐;王永强 申请(专利权)人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
主分类号: C12N7/01 分类号: C12N7/01;C12N15/85;A61K39/295;A61K39/21;A61K39/245;A61P31/14;C12R1/93
代理公司: 11139 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 代理人: 孙皓晨;马鑫
地址: 150001 黑龙*** 国省代码: 黑龙;23
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摘要: 发明公开了一种表达J亚群禽白血病病毒(ALV‑J)Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用,属于医学或兽医学技术领域。本发明利用重组克隆技术,将包含ALV‑J Gag和Env基因以及CAG启动子序列的基因片段CAG‑ALVGE插入到鸡马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的US2基因内部,构建获得在US2基因内部插入CAG‑ALVGE表达框的重组粘粒,由其拯救获得表达ALV‑J Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株。研究表明,本发明获得的疫苗株具有与亲本毒814疫苗株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性,并且能够同时抵抗MDV超强毒株以及ALV‑J超强毒株的攻击。由此可见,本发明获得的表达ALV‑J Gag和Env基因的重组MDV疫苗株可以用于制备预防或治疗禽白血病和鸡马立克氏病的药物。
搜索关键词: 表达 亚群禽 白血病病毒 gag env 基因 重组 鸡马立克氏病 病毒 疫苗 及其 构建 方法
【主权项】:
1.表达J亚群禽白血病病毒Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株,其特征在于是将包含J亚群禽白血病病毒Gag和Env基因和CAG启动子序列的表达框架CAG-ALVGE插入到鸡马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的US2基因内部,获得在US2基因内部插入CAG-ALVGE表达框架的重组粘粒,由其拯救获得表达J亚群禽白血病病毒Gag和Env基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株,其中,US2基因缺失了其中第15至630位的核苷酸,代之以插入CAG-ALVGE表达框架,所述的CAG-ALVGE表达框架的结构为CMV增强子-鸡β-actin启动子-Gag基因-IRES2序列-Env基因-sv40 PolyA,所述的CAG-ALVGE表达框架的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。/n
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