[发明专利]一种红曲霉菌体ACE抑制肽的纯化方法

摘要

本发明公开了一种红曲霉菌体ACE抑制肽的纯化方法，属于多肽物质纯化技术领域。采用柱层析和半制备级高效液相色谱的方法分离纯化红曲霉液态发酵的菌丝体ACE抑制肽，具体步骤为红曲霉菌丝体ACE抑制肽干粉的复溶、柱层析分离菌丝体ACE抑制肽、活性组分峰的富集、RP-HPLC分离菌丝体ACE抑制肽、RP-HPLC活性组分峰的富集。使用该纯化方法得到的红曲多肽活性组分具有较好的降血压功效，具有开发降血压保健食品的潜力，同时本发明的方法具有纯化分离度高、操作简单、活性组分损失少和纯化所得组分降血压活性高的优点。

主权项

一种红曲霉菌体ACE抑制肽的纯化方法，其特征在于：该纯化方法包括以下步骤：(1)红曲霉菌丝体ACE抑制肽干粉使用PBS缓冲液进行复溶；(2)对复溶后的ACE抑制肽溶液进行离心，离心条件为3000r/min、5min，收集上清液后使用0.22微米的水系微孔滤膜过滤，所得滤液采用葡聚糖凝胶柱层析，收集红曲霉菌丝体ACE抑制肽活性组分峰；(3)将步骤(2)收集的各组分收集液冷冻干燥后使用PBS缓冲液配成相同浓度，分别测定各组分的ACE抑制活性；(4)对步骤(3)中具有最高ACE抑制活性的组分E进行离心，离心条件为3000r/min、5min，收集上清液后再使用0.22微米的水系微孔滤膜过滤处理，所得滤液采用RP‑HPLC进行进一步分离，条件为：进样量10mL，柱温25℃,流动相为超纯水，流速5mL/min,蛋白检测波长为220nm；(5)收集组分E经RP‑HPLC分离所得的各活性组分峰，将各组分收集液冷冻干燥后使用PBS缓冲液配成相同浓度，并分别测定各组分的ACE抑制活性。