[发明专利]细菌噬菌体基因组DNA提取试剂盒及方法

摘要

本发明提供了一种细菌噬菌体基因组DNA提取试剂盒及方法。试剂盒试剂包括：试剂A(氯仿)、试剂B(DNase I)、试剂C(RNase A)、试剂D(沉淀缓冲液)、试剂E(裂解缓冲液)、试剂F(主裂解主液)、试剂G(副裂解液)、试剂H(杂质去除液)、试剂I(DNA结合缓冲液)、试剂J(漂洗缓冲液)和试剂K(DNA洗脱液)；提取方法包括以下步骤：细菌菌体及其碎片去除、细菌核酸降解、噬菌体粒子沉淀、噬菌体衣壳蛋白结构破坏和水解、杂质去除、DNA离液、DNA吸附、吸附DNA清洗和吸附DNA洗脱。本发明的试剂盒和方法可以广泛使用于细菌噬菌体基因组DNA的提取，具有提取迅速、提取的DNA产量高、纯度高且不受宿主菌基因组DNA污染的优点。

主权项

一种细菌噬菌体基因组DNA提取试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：(1)试剂A：氯仿；(2)试剂B：用TE缓冲液配制的10‑20mg/ml的DNase I；(3)试剂C：用TE缓冲液配制的10‑20mg/ml的RNase A；(4)试剂D：含300‑400mg/ml的聚乙二醇‑8000和3M NaCl；(5)试剂E：每升含有5.8g NaCl、1.23g MgSO₄·7H₂O、50ml的1M pH8.0的Tris‑Cl和100ml0.05mol EDTA；(6)试剂F：150‑200mg/ml的十二烷基苯磺酸钠；(7)试剂G：用TE缓冲液配制的15‑25mg/ml的蛋白酶K；(8)试剂H：5‑6M NaCl；(9)试剂I：含6‑7M异硫氰酸胍和100mM Tris，pH 6.4；(10)试剂J：由5‑10mM pH 8.0的Tris‑Cl与无水乙醇按1:4的体积比混合而成；(11)试剂K：5‑10mM pH 8.0的Tris‑Cl；所述的TE缓冲液含有10mM三羟基甲基氨基四烷和1mM乙二酸四乙酸，pH 8.0。