[发明专利]一种从大兴安岭野生蓝莓中酶解提取高纯度白藜芦醇的方法

摘要

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生蓝莓中酶解提取高纯度白藜芦醇的方法。本发明以大兴安岭采摘的蓝莓果实为原料，经生物酶解反应、水提醇沉深度提取和分离浓缩、干燥的简化工艺而制得高纯度白藜芦醇晶体粉末产品。本发明方法具有生物酶解充分，且耗时短，能耗成本低，运行安全性高，充分利用原料和有机溶剂，废液主要为水，有利于环境保护，易于工业化推广应用等特点。用本发明方法制备出的白藜芦醇晶体粉末产品具有纯度高，可高达98％以上；收率高，可达到1.40％。

主权项

一种从大兴安岭野生蓝莓中酶解提取高纯度白藜芦醇的方法，其特征在于，所述方法的具体步骤如下：(1)生物酶解反应：先将大兴安岭采摘的蓝莓果实原料放置于粉碎机中进行粉碎，经180～220目的筛进行分筛，收集过筛的蓝莓汁，备用，未过筛的颗粒再返回粉碎机中进行粉碎。按蓝莓粉末的质量(g)∶纤维素酶的质量(mg)∶三水醋酸钠缓冲溶液的体积(mL)之比为1∶(1～10)∶(10～50)的比例，先用高浓度盐酸或氢氧化钠溶液调节所述缓冲溶液的pH值为4.5‑6.2后，将蓝莓粉末和调节pH值后的缓冲溶液，依次放置于间歇式反应器中，在35～55℃恒温和95～180r/min的转速下，搅拌15～20min后，再加入纤维素酶，继续恒温搅拌，进行酶解反应4～8h，就制得酶解反应后的固液混合物。(2)水提醇沉深度提取将制得的生物酶解反应后的固液混合物，经板框压滤机进行压滤，收集滤液及固体残渣；将固体残渣放置于提取罐中，加入60％～70％的甲醇溶液进行提取，其体积比为1g∶(10～20)mL，提取温度为35～60℃、搅拌速度为95～180r/min；提取25～60min后，过滤，收集过滤液和残渣；残渣反复提取两次，收集过滤液，合并几次过滤液经减压浓缩，收集浓缩液，回收甲醇；得白藜芦醇粗品液；(3)制备高纯度白藜芦醇晶体粉末产品①大孔树脂的初步分离与洗脱将所得白藜芦醇粗品液用大孔树脂进行吸附，所用大孔树脂为NKA‑II型或AB‑8型或HPD950型树脂中的一种，吸附为静态吸附或动态吸附。将白藜芦醇粗品液以1.5～3BV/h的流量通入分离柱进行吸附，收集流出的溶液，用40～90％浓度的乙醇对大孔树脂进行梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩回收乙醇；②制备高纯度白藜芦醇晶体粉末产品按中性氧化铝的质量∶收集的洗脱液体积之比为1g∶(10～20)mL的比例，采用常规填充方法将中性氧化铝填充入层析柱中后，先用恒流泵，将体积为1.5～3BV的、体积分数为60～80％的乙醇溶液，以1.5～3BV/h的流量通入所述的层析柱内进行润洗、脱色，收集流出的脱色液，然后，对收集的脱色液，通过三效蒸发浓缩器蒸发浓缩，收集浓缩液，浓缩回收乙醇溶剂；按活性炭的质量∶收集的浓缩液的体积之比为1g∶(50～100)mL的比例放置于脱色罐中进行纯化、脱色，常温搅拌1～5h，进行抽滤，收集滤液；通过三效蒸发浓缩器，进行蒸发浓缩至浓缩液的体积为浓缩前体积的1/5～1/30为止，收集浓缩液，浓缩回收乙醇；将浓缩液放置于冷冻干燥箱中，先在‑10～‑18℃预冻2～3h，再在压力为20～60Pa、温度为‑40～‑60℃条件下，冷冻干燥24～30h，制得白藜芦醇晶体粉末产品。