[发明专利]一种高静压结合酶解法制备低敏性白果蛋白粉的方法

摘要

本发明涉及一种高静压结合酶解法制备低敏性白果蛋白粉的方法。将新鲜白果脱壳、粉碎后，用Tris‑HCl溶液提取、饱和(NH4)₂SO₄分级沉淀制备白果蛋白，白果蛋白先用蒸馏水配制成一定浓度的白果蛋白溶液，将其密封于双层聚乙烯塑料袋中，抽真空密封后，置于高压设备中进行高静压处理20～30min，然后取高压处理后白果蛋白样品，于90℃条件下热处理5 min，调节溶液的pH值至蛋白酶最适宜的水解pH，再按一定比例加入蛋白酶进行水解1～2 h，水解温度为蛋白酶最佳水解温度，水解结束后在95℃下灭酶活10 min，水解样品进行冷冻干燥后，即得低敏性白果蛋白粉。采用该技术制得的白果蛋白粉，致敏性低或无过敏性，且具有很好的溶解性、乳化性和抗氧化活性，产品附加值高，可以成为工业上生产低敏性白果蛋白粉的一种新技术。

主权项

一种高静压结合酶解法制备低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于，其步骤如下：（1）白果蛋白的分离纯化取新鲜白果脱壳，冷冻干燥后，研磨过筛，用石油醚脱脂至脱脂完全为止，待石油醚完全挥发后，按1:15～20g/mL的比例加入pH 7.4的浓度为0.2mol/L的 Tris‑HCl溶液进行蛋白提取，4℃下磁力搅拌24～48h，然后在4℃下5000r/min 冷冻离心15min，上清液分别通过40和80g/100mL 饱和度的(NH4)₂SO₄进行分级沉淀，4℃下5000r/min 冷冻离心30min，沉淀用少量pH 8.0的浓度为0.01mol/L的Tris‑HCl溶液溶解，置于截留分子量为3.5 kDa的透析袋中用相同的Tris‑HCl溶液进行透析，透析液冷冻干燥后得到白果蛋白；（2）高静压处理 取一定量的白果蛋白，用蒸馏水配制成浓度为40～60 mg/mL的白果蛋白溶液，将其密封于双层聚乙烯塑料袋中，抽真空密封后，置于高压设备中，于25℃条件下进行高静压处理，处理压力范围为100～700MPa，处理时间均为20～30min；（3）蛋白酶水解取一定量上述高压处理后的白果蛋白样品，于90 ℃条件下热处理5 min，然后用1 mol/L HCl 或1 mol/ L NaOH调节溶液的pH值至蛋白酶最适宜的水解pH，根据白果蛋白样品质量，按1～5%的质量比例加入蛋白酶进行水解，水解温度为蛋白酶最佳水解温度，水解时间为1～2 h ，水解结束后在95 ℃下灭酶活10 min，然后将水解样品进行冷冻干燥，即得到低敏性白果蛋白粉。