[发明专利]分离小鼠内耳毛细胞的方法在审
| 申请号： | 201610190542.9 | 申请日： | 2016-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN107236698A | 公开（公告）日： | 2017-10-10 |
| 发明（设计）人： | 朱光洁;高下;朱敏生;周函;马登滨 | 申请（专利权）人： | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 南京中新达专利代理有限公司32226 | 代理人： | 孙鸥,朱杰 |
| 地址： | 210008 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及分离小鼠内耳毛细胞的方法。本发明取出小鼠耳蜗去除表面骨质，分离取得耳蜗膜迷路，去除周边组织，分离出带柯替氏器的基底膜，胶原酶消化作用后显微分割出内毛细胞区及外毛细胞区，得到小段细胞簇，用带缓冲液的玻璃吸管分别吸取分割后的内外毛细胞簇，再吹出于载玻片上，获得离单的内外毛细胞。本发明克服了用胰蛋白酶消化后机械吹打基底膜组织分离筛选毛细胞所带来的缺陷。本发明定位准确，组织损伤小，耗时短，胶原酶更适用于消化分离毛细胞周围的纤维结缔组织，对毛细胞本身损伤小，单细胞活性质量高，筛选单细胞工作量大大减少，工作效率提高。 | ||
| 搜索关键词： | 分离 小鼠 内耳 细胞 方法 | ||
【主权项】：
分离小鼠内耳毛细胞的方法，其特征在于步骤如下：(1)取出小鼠耳蜗去除表面骨质，分离取得耳蜗膜迷路；(2)去除周边组织，分离出带柯替氏器的基底膜；(3)胶原酶消化作用后显微分割出内毛细胞区及外毛细胞区，得到小段细胞簇；(4)用带缓冲液的玻璃吸管分别吸取分割后的内外毛细胞簇，再吹出于载玻片上，即可获得离单的内外毛细胞。
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