[发明专利]一种HPLC‑MS/MS同时测定6种水溶性维生素含量的方法

摘要

本发明公开了一种HPLC‑MS/MS同时测定6种水溶性维生素含量的方法。该方法采用浓度为0.02mol/L、pH=4的乙酸铵溶液对饲料中的维生素进行提取并使用Capcell PAKADME(2.1mmI.D×150mm，3μm)的色谱柱进行检测，能同时测定出待测料中硫胺素、核黄素、烟酸、吡哆醇、生物素、钴胺素六种维生素的含量，且测定精度高、速度快、操作方便。

主权项

一种HPLC‑MS/MS同时测定6种水溶性维生素含量的方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）、待测料和标准样品的预处理：称取待测料，称取待测料，将待测料用浓度为0.02mol/L、pH=4的乙酸铵溶液进行配制得待测样品；称取硫胺素、核黄素、烟酸、吡哆醇、生物素、钴胺素标准品配制成标准物质工作液；（2）、将步骤（1）得到的标准物质工作液和待测样品分别用HPLC‑MS/MS进行检测，分别得到色谱图和质谱图；液相色谱条件为：色谱柱：Capcell PAKADME，规格参数为2.1mmI.D×150mm，3μm；流速：0.2‑0.4mL/min；柱温：30‑40℃；样品温度：10‑15℃；进样量：5μL；流动相A：甲酸的体积分数为0.1%的甲醇溶液，流动相B：0.02mol/L乙酸铵溶液，采用梯度洗脱程序，流速为0.3mL/min，梯度条件为：100%B；0～12min，100%～10%B；12‑14min，10%B；14.01min，100%B；（3）、将步骤（2）得到的色谱图和质谱图进行处理，对6种维生素进行定性和定量，分别得到待测样品的中6种维生素质量浓度，然后计算得到待测样品中6中维生素的含量。