[发明专利]一种草酸脱羧酶及草酸脱羧酶的重组表达方法在审
| 申请号： | 201610217032.6 | 申请日： | 2016-04-08 |
| 公开（公告）号： | CN105695441A | 公开（公告）日： | 2016-06-22 |
| 发明（设计）人： | 刘海峰;吴玉峰;宋保平 | 申请（专利权）人： | 武汉康复得生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;A23L33/10;A61K38/51;A61P13/04;A61P13/00;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人： | 程殿军;张瑾 |
| 地址： | 430050 湖北省武汉市东湖高*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种草酸脱羧酶及草酸脱羧酶的重组表达方法，该草酸脱羧酶为通过大肠杆菌表达系统进行重组表达，并在pH＜3.0时稳定且有活力；表达过程中该草酸脱羧酶的蛋白序列较原生酶蛋白序列缺失信号肽片段。重组表达方法适用于pH低于3.0时仍有活力的草酸脱羧酶，是将优化后草酸脱羧酶编码基因的DNA片段与大肠杆菌表达载体按照3～9:1的摩尔比混合进行连接，构建重组表达载体，重组表达载体转化DH5a感受态细胞；通过PCR及测序验证来筛选构建成功的重组表达载体转化菌，培养后抽取重组表达载体，转化含有分子伴侣的大肠杆菌表达菌株，15～30℃培养并诱导蛋白表达。提高了表达效率，简化生产步骤，降低生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 草酸 脱羧酶 重组 表达 方法 | ||
【主权项】：
一种草酸脱羧酶，其特征在于：为通过大肠杆菌表达系统进行重组表达，并在pH＜3.0时稳定且有活力；表达过程中该草酸脱羧酶的蛋白序列较原生酶蛋白序列缺失信号肽片段。
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