[发明专利]Y型含细胞的神经导管制备方法

摘要

本发明涉及Y型含细胞的神经导管制备方法。该方法可实现多种材料和多结构集成加工，直接利用生物3D打印、细胞电纺丝和近场直写相复合的工艺制备神经导管。具体步骤为：(1)用加热装置将可降解高分子聚合物1热熔后，采用3D打印工艺制备出神经导管内层结构体；(2)配制可降解高分子聚合物2，高温蒸汽消毒后，旋转由(1)制备的内层结构体，同时采用3D打印工艺在其表面制备中间层；(3)配制可降解高分子聚合物3，进行高温蒸汽消毒；将细胞悬液加入聚合物3材料里面；旋转由(2)制备的结构体，采用细胞电纺丝和近场直写复合工艺制备神经导管外层。本发明整个制备方法简单易行，对神经缺损快速修复具有重大的现实意义。

主权项

Y型含细胞的神经导管制备方法，神经导管由可降解的高分子聚合物和细胞组成，利用生物3D打印挤出成形、细胞电纺丝和近场直写复合工艺制备，包括以下步骤：1)称取15克明胶材料，在搅拌情况下缓缓加入到80克的去离子水中，至充分溶胀后升温至80℃左右加速溶解，并保温3小时制得均匀的高分子溶液，再经100℃高温蒸汽消毒，将消毒后的材料装入喷头二中备用；2)称取1.5克聚乙烯醇(PVA)材料，在搅拌情况下缓缓加入到15克的去离子水中，至充分溶胀后升温至80℃左右加速溶解，并保温3小时制得均匀的高分子溶液，再经100℃高温蒸汽消毒；3)第4代人的细胞用0.25％的胰蛋白酶消化后收集在50mL离心管，1000r/min离心5min，弃上清液，将细胞悬液移至消毒后的PVA材料搅拌均匀得到含细胞的PVA溶液，将其装入喷头三中备用；4)称取10克聚对二氧环己酮(PPDO)颗粒置于喷头一(内层神经导管挤出喷头)加热装置中，将加热装置的温控器温度设为110℃，对PPDO进行加热，当温度达到设定值时保温2分钟。喷头一与接收平台的距离为1.5mm，将材料以370ul/min稳定流量由微量泵提供，进行连续挤出。同时接收平台按照所构建的Y型神经导管模型沿X/Y方向进行规律运动，并迅速固化成形，完成内层神经导管制备；5)将固化成形后的内层神经导管安装在旋转装置上，运动到喷头二(中间层神经导管挤出喷头)工位，喷头与内层神经导管的外表面距离为0.5mm，将材料以400ul/min稳定流量由微量泵提供，进行连续挤出。旋转装置一边旋转一边移动，明胶材料包裹住PPDO并固化成形，完成中间层神经导管；6)旋转装置运动到喷头三(外层神经导管喷头)工位，喷头三上加载8KV的直流电压，喷头和神经导管之间的距离为5mm，负极加载在接收平台上。将材料以180ul/min稳定流量由微量泵提供，旋转装置一边旋转一边移动，纺丝3个小时，在中间层神经导管上沉积一层含细胞的纳米纤维膜，完成神经导管的整个制备。