[发明专利]一种减少小球藻贴壁的培养方法

摘要

本发明公开了一种减少小球藻贴壁的养殖方法，该方法通过在制得本发明的BG‑11培养液中加入终浓度为10‑300ppm乳化剂，而制得本发明减少小球藻贴壁的培养液，减少小球藻贴壁的培养方法是以所述本发明减少小球藻贴壁的培养液对小球藻进行培养。所培养的小球藻细胞到达稳定期时，每升培养液可获得细胞干重为875‑956mg，比未添加乳化剂的BG‑11小球藻培养液提高了40‑66％，培育出的小球藻安全、无毒，对小球藻的生长没有任何不利的影响，特别适合作为保健品、饲料、食品添加剂、精细化工品和医药制剂原料。

主权项

一种减少小球藻贴壁的养殖方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)以新鲜自来水为溶剂，配制BG‑11培养液，所述的BG‑11培养液成分(g/L)：1)母液1：NaNO₃，1.5；MgSO₄·7H₂O，7.5×10^‑2；CaCl₂，3.6×10^‑2；柠檬酸，6.5×10^‑3；EDTANa₂·2H₂O，1.0×10^‑3；2)母液2：柠檬酸铁铵，6.0×10^‑3；；3)母液3：K₂HPO₄，1.75×10^‑1；4)母液4：H₃BO₃，2.86×10^‑3；MnCl₂·4H2O，1.81×10^‑3；Na₂MoO₄·2H₂O，3.91×10^‑4；ZnSO₄·7H₂O，2.22×10^‑4；CuSO₄·5H₂O，7.9×10^‑5；Co(NO₃)₂·6H₂O，4.947×10^‑5；(2)按照母液1的配方，取各化合物溶于新鲜自来水中，120℃，30min灭菌，得到母液1；按照母液2的配方，取柠檬酸铁铵溶于新鲜自来水中，120℃，30min灭菌，得到母液2；按照母液3的配方，取K₂HPO₄溶于新鲜自来水中，120℃，30min灭菌，得到母液3；按照母液4的配方，取各化合物溶于新鲜自来水中，120℃，30min灭菌，得到母液4；再取母液1 10mL、母液2 1mL、母液3 1mL和母液4 1mL，混合后，用新鲜自来水定容至1L，120℃，30min灭菌，得到所述的BG‑11培养液；(3)添加乳化剂：将乳化剂加入到步骤(2)获得所述的BG‑11培养液中，使乳化剂的终浓度为10‑300ppm，即得到减少小球藻贴壁的培养液；(4)在超净工作台中，取小球藻接种到所述的减少小球藻贴壁的培养液中，小球藻的接种量为培养液的10‑20％的体积占比，将培养瓶置于光照培养箱中静置培养，光照3000‑4000Lx、光暗比12h：12h、温度25‑33℃的环境下培育，通空气量为1.0L/min，每天定时摇动5‑10次，培养周期为7‑10天。