[发明专利]一种淡紫拟青霉壳聚糖酶的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201610251264.3 | 申请日： | 2016-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN105713886A | 公开（公告）日： | 2016-06-29 |
| 发明（设计）人： | 解孝满;程仕伟;吴府胜;韩彪;李文清;张萍 | 申请（专利权）人： | 山东省林木种质资源中心 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12P19/26;C12P19/14;C12R1/79 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 李素红 |
| 地址： | 250014 *** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种淡紫拟青霉壳聚糖酶的制备方法及其应用，属于生物技术领域，该壳聚糖酶是由保藏号为CGMCC No.10026的菌株发酵获得的，离心过滤去菌体后经硫酸铵沉淀后再经Sephadex G-100柱层析纯化后制备精纯酶。本发明纯化后的淡紫拟青霉壳聚糖酶能高效酶解壳聚糖，且产物壳寡糖的得率高、生理活性强，适合工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 淡紫 青霉 聚糖 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种淡紫拟青霉壳聚糖酶的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：(1)粗酶制备：淡紫拟青霉YT08发酵液经10000r/min离心5min，去除菌体后收集保留上清液，然后再经微孔过滤膜过滤除淡紫拟青霉YT08菌体，即为粗酶液；(2)淡紫拟青霉壳聚糖酶纯化：在步骤(1)获得的粗酶液中加入固体硫酸铵至30％的饱和度，4℃冰箱冷藏静置5～10h后，离心去除杂蛋白，并收集上清液；离心去杂蛋白后的上清液上再加入固体硫酸铵至80％的饱和度，4℃冰箱冷藏静置过夜，离心，收集沉淀；用pH5.0的0.2mol/L HAc‑NaAc缓冲液溶解沉淀，在透析袋中透析除盐，透析后的酶液经PEG4000浓缩后经Sephadex G‑100柱层析纯化，用0.2mol/L pH5.0HAc‑NaAc缓冲液洗脱，流速在0.5～1mL/min；检测每管酶液的酶活力和蛋白含量，合并酶峰部分的酶液，最后经PEG4000浓缩，即得纯化后的淡紫拟青霉壳聚糖酶，冷冻干燥后制得固态淡紫拟青霉壳聚糖酶。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东省林木种质资源中心，未经山东省林木种质资源中心许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610251264.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
