[发明专利]一种提高冷冻原代肝细胞复苏后细胞活性的方法在审
| 申请号： | 201610254740.7 | 申请日： | 2016-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN107304410A | 公开（公告）日： | 2017-10-31 |
| 发明（设计）人： | 胡卓汉;孙易;余斐斐;李楠 | 申请（专利权）人： | 瑞德肝脏疾病研究（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 201203 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物技术领域,涉及生物材料保存技术,具体涉及一种体外哺乳动物肝细胞系统的复苏方法。本发明方法中将冷冻的原代肝细胞从液氮中取出水浴解冻后，将原冻存细胞液直接加入到含1 ml的incubation buffer，蓝染色后细胞计数并计算细胞活率；本方法省略了复苏原代肝细胞中的离心步骤，简化缩短了复苏原代肝细胞的方法时间；结果证明，通过避开离心步骤，能提高原代肝细胞的实际回收率和活性，便于后面试验的利用，以及未离心导致的DMSO的残留对原代肝细胞的代谢能力和活性无影响，本方法可以广泛被使用到药物在肝细胞中的代谢稳定性、肝细胞对药物的摄取评价等试验中。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 冻原 肝细胞 复苏 细胞 活性 方法 | ||
【主权项】：
一种提高冷冻原代肝细胞复苏后细胞活性的方法，其特征在于，其包括：将冷冻的原代肝细胞从液氮中取出，水浴解冻后，将原冻存细胞液直接加入到含有1 ml的incubation buffer，台盼蓝染色后，细胞计数并计算细胞活率；然后继续用incubation buffer将细胞密度稀释到试验所需条件。
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