[发明专利]一种基于核酸适配体的酶联免疫吸附技术检测石斑鱼虹彩病毒感染的方法在审
| 申请号： | 201610259525.6 | 申请日： | 2016-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN105785024A | 公开（公告）日： | 2016-07-20 |
| 发明（设计）人： | 秦启伟;李鹏飞;魏世娜;周伶俐 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | G01N33/58 | 分类号： | G01N33/58;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 朱聪聪;刘明星 |
| 地址： | 510301 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种基于核酸适配体的酶联免疫吸附技术检测石斑鱼虹彩病毒感染的方法。将生物素标记的核酸适配体与待测的细胞或组织孵育结合，然后将待测样品清洗后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，孵育结束后清洗待测样品，加入辣根过氧化物酶显色试剂盒中TMB显色液进行显色反应，根据吸光值的变化判断待测细胞或组织样品是否受到石斑鱼虹彩病毒的感染。与现有的基于抗体的ELISA技术相比，本发明中基于核酸适配体的ELISA技术的优点在于：特异性强、灵敏度高、操作便捷、适用于在养殖场中养殖鱼类虹彩病毒感染的大批量快速检测，在虹彩病毒感染的检测领域有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 核酸 适配体 免疫 吸附 技术 检测 石斑鱼 虹彩 病毒感染 方法 | ||
【主权项】：
一种基于核酸适配体的酶联免疫吸附技术检测石斑鱼虹彩病毒感染的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、将SEQ ID NO.1～3所示的任意一条生物素标记的石斑鱼虹彩病毒核酸适配体与待测样品进行结合，然后清洗；(2)、将步骤(1)中结合了核酸适配体的样品进行离心，移除上清，将富集到的样品与辣根过氧化物酶‑链霉亲和素混匀进行结合；(3)、步骤(2)得到的结合了辣根过氧化物酶‑链霉亲和素的样品进行清洗，然后移入酶标板中，每孔加入TMB显色液避光反应，最后加入终止液终止反应；(4)、检测待测样品在450nm处的吸光值，根据吸光值的变化来判断样品室是否被石斑鱼虹彩病毒感染。
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